GV3101（pJlC SA-rep）感受态细胞100ul*50

库存 ：43

英文名 ：GV3101（pJlC SA-rep）感受态细胞

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海博湖

保存条件 ：低温冷藏

规格 ：100ul*50

GV3101（pJlC SA-rep）感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
产品名称：GV3101（pJlC SA-rep）感受态细胞100ul*50
规格：100ul*50
分类：根癌农杆菌感受态细胞
保存条件（保质期）：   -80℃（6个月）

GV3101（pJlC SA-rep）感受态细胞100ul*50注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3.  当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9801盐酸氟哌噻吨Flupenthixol dihydrochloride质量规格：>99%,BR
豹猫肺成纤维样细胞;LCL1 张氏肝细胞，HeLa[Chang Liver]细胞 LLC-PK1细胞，猪肾细胞茶多酚;绿茶提取物Tea polyphenol质量规格：多酚含量≥98
人肺成纤维细胞;HFL1四氢姜黄素 Tetrahydrocurcumin质量规格：HPLC≥98%,BR
HA Others H6N1 甲型流感 H6N1 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 管花苷A(标准品)Tubuloside A质量规格：HPLC≥98,标准品
原代表皮角化细胞特制基础培养基Many types of cells包装：500/250/100ml2’-乙酰基毛蕊花糖苷(标准品)2'-Acetylacteoside质量规格：HPLC≥98%,标准品
MDA-MB-468 人癌细胞雷诺嗪Ranolazine HCl质量规格：>99%,BR
HCC827人非小细胞肺癌细胞 HCC827 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS艾力替尼甲磺酸盐(AST1306)AST-1306 mesylate质量规格：>98%,BR
SCGB1A1 Protein Human 重组人 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 标签)拉罗皮兰,MK0524Laropiprant,MK-0524质量规格：>98%,BR
人胚胎肌肉组织来源细胞;CCC-HSM-2 人小气道平滑肌细胞完全培养基 100mL盐酸头孢噻呋Ceftiofur hydrochloride质量规格：>98%,BR
人肺鳞癌细胞;NCI-H520盐酸头孢噻呋(标准品)Ceftiofur hydrochloride质量规格：含量测定
锌试剂(≥85%（HPLC）)  Zincon  质量规格：≥85%（HPLC） 抗淬灭剂Ⅰ(活体染色持久发光)5/20毫升
1,3-二甲基-5-吡唑酮  1,3-Dimethyl-5-pyrazolone  质量规格：0.96 离子膜通道转运功能检测试剂盒20
氟啶胺（标准品）  Fluazinam  质量规格：分析标准品 粒性白细胞染色试剂盒50
氟节胺（标准品）  Flumetralin  质量规格：分析标准品 马β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA检测试剂盒Horseamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit 96T/48T
氯吡脲（标准品）  Forchlorfenuron  质量规格：分析标准品 马β内啡肽(β-EP)ELISA检测试剂盒horseBeta-Endorphin,β-EPELISAKit 96T/48T
氯氟吡氧乙酸（标准品）  Fluroxypyr  质量规格：分析标准品 马免疫球蛋白E(IgE)ELISA检测试剂盒HorseImmunoglobulinE,IgEELISAKit 96T/48T
麦穗宁（标准品）  Fuberidazole  质量规格：分析标准品 猫p27核心抗原(P27)ELISA检测试剂盒Felisp27coreaigen,P27ELISAKit 96T/48T
双氟磺草胺（标准品）  Florasulam  质量规格：分析标准品,99.8% 猫α干扰素(IFN-α)ELISA检测试剂盒FelisIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T
增甘膦（标准品）  Glyphosine  质量规格：分析标准品 猫细小病毒抗体(FPV)ELISA检测试剂盒Felisparvovirus,FPVELISAKit 96T/48T
氟铃脲（标准品）  Hexaflumuron  质量规格：分析标准品,99% 绵羊白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒SheepIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T
GV3101（pJlC SA-rep）感受态细胞100ul*50康奈馨完全培养基500毫升溶液/片剂 锌试剂(AR)  Zincon  质量规格：AR
抗淬灭剂Ⅰ(活体染色持久发光)5/20毫升 锌试剂(≥85%（HPLC）)  Zincon  质量规格：≥85%（HPLC）
离子膜通道转运功能检测试剂盒20 1,3-二甲基-5-吡唑酮  1,3-Dimethyl-5-pyrazolone  质量规格：0.96
粒性白细胞染色试剂盒50 氟啶胺（标准品）  Fluazinam  质量规格：分析标准品
马β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA检测试剂盒Horseamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40 96T/48T 氟节胺（标准品）  Flumetralin  质量规格：分析标准品
马β内啡肽(β-EP)ELISA检测试剂盒horseBeta-Endorphin,β-EP 96T/48T 氯吡脲（标准品）  Forchlorfenuron  质量规格：分析标准品
马免疫球蛋白E(IgE)ELISA检测试剂盒HorseImmunoglobulinE,IgE 96T/48T 氯氟吡氧乙酸（标准品）  Fluroxypyr  质量规格：分析标准品
猫p27核心抗原(P27)ELISA检测试剂盒Felisp27coreaigen,P27 96T/48T 麦穗宁（标准品）  Fuberidazole  质量规格：分析标准品
猫α干扰素(IFN-α)ELISA检测试剂盒FelisIerferonα,IFN-α 96T/48T 双氟磺草胺（标准品）  Florasulam  质量规格：分析标准品,99.8%
猫细小病毒抗体(FPV)ELISA检测试剂盒Felisparvovirus,FPV 96T/48T 增甘膦（标准品）  Glyphosine  质量规格：分析标准品
GV3101（pJlC SA-rep）感受态细胞100ul*50操作说明：
1. 0.1cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19；   --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。