OverExpress C43(DE3) 感受态细胞100ul*50

OverExpress C43(DE3) 感受态细胞100ul*50

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品牌:博湖

货号:BH-G2143

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英文名 :OverExpress C43(DE3) 感受态细胞

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海博湖

保存条件 :低温冷藏

规格 :100ul*50

产品名称:OverExpress C43(DE3) 感受态细胞100ul*50
规格:100ul*50
分类:表达感受态细胞
保存条件(保质期):   -806个月)


OverExpress C43(DE3) 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
OverExpress C43(DE3) 感受态细胞100ul*50注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3.   DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80以下,高于-80超期储存会导致转化效率会下降。
OverExpress C43(DE3) 感受态细胞100ul*50操作说明:
1. 0.1cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. -80保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19   --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μFPC=200 ΩV=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml 37225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37培养箱过夜培养 13-17 小时。
U-937细胞,组织细胞淋巴瘤细胞 低分化鼻咽癌细胞系,SUNE-1细胞 CL-03142V6.11(人胚肾细胞)5×106cells/瓶×2盐酸双环胺(标准品)DICYCLOMINE HYDROCHLORIDE质量规格:供TCL鉴别用

叙利亚仓鼠细胞系;Syrian Hamster AV12氯解1定(标准品)2-Pyridinealdoxime methochloride质量规格:HPLC法含量测定
MBL1 Others Mouse 小鼠 MBL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸赛庚啶(标准品)CYPROHEPTADINE HYDROCHLORIDE质量规格:HPLC法含量测定
原代系膜细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml氨基比林(标准品)Amidopyrine/aminopyrine质量规格:含量测定
CDK16 Others Human CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 沙利度胺(标准品)Thalidomide质量规格:含量测定
C2C12, 小鼠肌原细胞 人前列腺癌细胞,DU145细胞 SK-MES-1(人肺癌细胞)白杨素(标准品)Chrysin质量规格:HPLC>98%,分析标准品

人肺巨细胞癌低转移细胞株;PG-LH7白杨素Chrysin质量规格:>98%,BR
CPM Others Human CPM / Carboxypeptidase M 人细胞裂解液 (阳性对照) 刺芒柄花素(标准品)Formononetin质量规格:HPLC>98%,分析标准品
人肝星形细胞RNAHHSteC miRNA5 μg刺芒柄花素Formononetin质量规格:>98%,BR
TCN2 Others Mouse 小鼠 TCN2 / anscobalamin-II 人细胞裂解液 (阳性对照) 大豆素,黄豆苷元(标准品)Daidzein质量规格:HPLC>98%,分析标准品
盐酸达克罗宁(标准品)  Dyclonine hydrochloride  质量规格:含量测定 小鼠内皮细胞TEK酪酸激酶(Tie2)ELISA试剂盒 ,英文名: Tie2 ELISA Kit

SGI-1027  SGI1027  质量规格:>98%,DNMT抑制剂 小鼠内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 ,英文名: eNOS ELISA Kit
盐酸己新(标准品)  Bromhexine HCl  质量规格:含量测定 小鼠内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA检测试剂盒MouseEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 96T/48T
雷西莫特  R848,Resiquimod  质量规格:>98%,TLR7/TLR8激动剂 小鼠内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒 ,英文名: eNOS-3 ELISA Kit
羟甲烟胺(标准品)  N-(Hydroxymethyl)nicotinamide  质量规格:含量测定 小鼠内皮型合酶(eNOS)ELISA试剂盒 ,英文名: eNOS ELISA Kit
对氨基水杨酸异(标准品)  Pasiniazid  质量规格:UV法溶出度检查 小鼠内皮型合酶(NOS3)ELISA试剂盒 ,英文名: NOS3 ELISA Kit
曲匹布通(标准品)  Trepibutone  质量规格:UV法含量测定 小鼠内皮型合酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒 ,英文名: eNOS-3 ELISA Kit
曲匹地尔(标准品)  Trapidil  质量规格:供鉴别用 小鼠内皮抑素(ES)ELISA检测试剂盒MouseEndostatin,ESELISAKit 96T/48T
桂美酸(标准品)  CINAMETIC ACID  质量规格:溶出度检查 小鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒 ,英文名: ES ELISA Kit
奥拉米特(标准品)  Orazamide  质量规格:UV法溶出度检查 小鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒 ,英文名: EL ELISA Kit
OverExpress C43(DE3) 感受态细胞100ul*50小鼠内皮素1(EDN1)ELISA试剂盒 ,英文名: EDN1 ELISA Kit 盐酸地巴唑(标准品)  Bendazol hydrochloride  质量规格:HPLC法含量测定

小鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒 ,英文名: ET-1 ELISA Kit 氯喹(标准品)  Chloroquine diphosphate  质量规格:HPLC法含量测定
小鼠内皮素转化酶1(ECE1)ELISA试剂盒 ,英文名: ECE1 ELISA Kit 盐酸异丙嗪(标准品)  Promethazine Hydrochloride  质量规格:含量测定
小鼠内皮细胞TEK酪酸激酶(Tie2)ELISA试剂盒 ,英文名: Tie2 ELISA Kit 盐酸达克罗宁(标准品)  Dyclonine hydrochloride  质量规格:含量测定
小鼠内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 ,英文名: eNOS ELISA Kit SGI-1027  SGI1027  质量规格:>98%,DNMT抑制剂
小鼠内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA检测试剂盒MouseEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3 96T/48T 盐酸己新(标准品)  Bromhexine HCl  质量规格:含量测定
小鼠内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒 ,英文名: eNOS-3 ELISA Kit 雷西莫特  R848,Resiquimod  质量规格:>98%,TLR7/TLR8激动剂
小鼠内皮型合酶(eNOS)ELISA试剂盒 ,英文名: eNOS ELISA Kit 羟甲烟胺(标准品)  N-(Hydroxymethyl)nicotinamide  质量规格:含量测定
小鼠内皮型合酶(NOS3)ELISA试剂盒 ,英文名: NOS3 ELISA Kit 对氨基水杨酸异(标准品)  Pasiniazid  质量规格:UV法溶出度检查
小鼠内皮型合酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒 ,英文名: eNOS-3 ELISA Kit 曲匹布通(标准品)  Trepibutone  质量规格:UV法含量测定
 

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