OverExpress C43(DE3) 感受态细胞100ul*10

库存 ：44

英文名 ：OverExpress C43(DE3) 感受态细胞

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海博湖

保存条件 ：低温冷藏

规格 ：100ul*10

OverExpress C43(DE3) 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
产品名称：OverExpress C43(DE3) 感受态细胞100ul*10
规格：100ul*10
分类：表达感受态细胞
保存条件（保质期）：   -80℃（6个月）

OverExpress C43(DE3) 感受态细胞100ul*10注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3.  当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
FGF1 Protein Human 重组人 aFGF / FGF1 蛋白盐酸司来吉兰Selegiline HCl质量规格：>98%,MAO-B selective inhibitor
CTLL-2(小鼠T细胞) 5×106cells/瓶×2 人结膜成纤维细胞HConF3-氮杂双环【3.3.0】辛烷盐酸盐3-Azabicyclo (3.3.0) Octane HCL质量规格：>98%
原代系膜细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml盐酸舍曲林Sertraline HCL质量规格：>98.5%
VEGFA Others Human 人 VEGF 183 / VEGF-A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸舍曲林（标准品）Sertraline HCL质量规格：HPLC>98%,标准品
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY09287-乙基-10-羟基喜树碱(SN-38)SN38(7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin )质量规格：HPLC>98%,BR
RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞 Rattus百里香酚,麝香草酚Thymol质量规格：AR
FGFR1 Others Mouse 小鼠 FGFR1 / CD331 人细胞裂解液 (阳性对照) Sulfo NHS;N-羟基硫代琥珀sulfo-NHS质量规格：>99%,BR
人肝永生化细胞;THLE-3亚甲兰,亚甲基蓝Methylene Blue质量规格：BS
EPD2 Others Human 人 PDase 2 / EPD2 (aa 29-460) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸沃尼妙林Valnemulin HCl质量规格：>97%,BR
CL-0388NCI-H157(人非小细胞肺腺癌细胞)5×106cells/瓶×21酸泰乐菌素Tylosin phosphate 质量规格：>95%,BR
盐酸多奈哌齐-13C3  Donepezil-13C3 Hydrochloride  质量规格：美国进口 英文名称Humanlymphocytefunctionassociatedaigen-3ELISAKit人LFA-3(CD58)规格：96T/48T
5-O-去甲多奈哌齐  5-O-Desmethyl Donepezil  质量规格：美国进口 英文名称HumanMacrophageColony-StimulatingFactor，M-CSFELISAkit人巨噬细胞克隆刺激因子(M-CSF)规格：96T/48T
二氢多奈哌齐（非对映）  Dihydro Donepezil (Mixture of Diastereomers)  质量规格：美国进口 英文名称HumanMacrophage-DerivedChemokine，MDCELISAKIT人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC)规格：96T/48T
Dehydrodeoxy多奈哌齐（多奈哌齐杂质）  Dehydrodeoxy Donepezil (Donepezil Impurity)  质量规格：美国进口 英文名称HumanMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit人巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)规格：96T/48T
脱氧盐酸多奈哌齐  Deoxy Donepezil Hydrochloride  质量规格：美国进口 英文名称HumanMacrophageInflammatoryProtein-1β，MIP-1βELISAkit人巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)规格：96T/48T
rac (cis/trans)多奈哌齐N-氧化物  rac (cis/trans) Donepezil N-Oxide  质量规格：美国进口 英文名称HumanMacrophageInflammatoryProtein-3α,MIP-3αELISAkit人巨噬细胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)规格：96T/48T
6-O-去甲多奈哌齐  6-O-Desmethyl Donepezil  质量规格：美国进口 英文名称HumanMacrophageInflammatoryProtein-3β,MIP-3βELISAkit人巨噬细胞炎性蛋白-3β(MIP-3β)规格：96T/48T
脱氢多奈哌齐（多奈哌齐杂质）  Dehydro Donepezil (Donepezil Impurity)  质量规格：美国进口 英文名称HumanMacrophageMigRationInhibitoryFactorELISAKit人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
多佐胺中间体  Dorzolamide intermediate  质量规格：美国进口 英文名称HumanMaixmetalloproteinase-10—MMP-10ELISAkit人基质金属蛋白酶10(MMP-10)规格：96T/48T
6‘-羟基多沙唑嗪  6'-Hydroxy Doxazosin  质量规格：美国进口 英文名称HumanMaixmetalloproteinase-13—MMP-13ELISAkit人基质金属蛋白酶13(MMP-13)规格：96T/48T
OverExpress C43(DE3) 感受态细胞100ul*10英文名称Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2人脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA试剂盒规格：96T/48T 10-氧多烯紫杉醇  10-Oxo Docetaxel  质量规格：美国进口
英文名称HumanLpa人脂蛋白(Lpa)规格：96T/48T 7-Epi-多烯紫杉醇  7-Epi-docetaxel  质量规格：美国进口
英文名称HumanLPS人脂多糖(LPS)规格：96T/48T 6,7-环氧多烯紫杉醇  6,7-Epoxy Docetaxel(Mixture of Diastereomers)  质量规格：美国进口
英文名称Humanlymphocytefunctionassociatedaigen-3人LFA-3(CD58)规格：96T/48T 盐酸多奈哌齐-13C3  Donepezil-13C3 Hydrochloride  质量规格：美国进口
英文名称HumanMacrophageColony-StimulatingFactor，M-CSF人巨噬细胞克隆刺激因子(M-CSF)规格：96T/48T 5-O-去甲多奈哌齐  5-O-Desmethyl Donepezil  质量规格：美国进口
英文名称HumanMacrophage-DerivedChemokine，MDC人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC)规格：96T/48T 二氢多奈哌齐（非对映）  Dihydro Donepezil (Mixture of Diastereomers)  质量规格：美国进口
英文名称HumanMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1α人巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)规格：96T/48T Dehydrodeoxy多奈哌齐（多奈哌齐杂质）  Dehydrodeoxy Donepezil (Donepezil Impurity)  质量规格：美国进口
英文名称HumanMacrophageInflammatoryProtein-1β，MIP-1β人巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)规格：96T/48T 脱氧盐酸多奈哌齐  Deoxy Donepezil Hydrochloride  质量规格：美国进口
英文名称HumanMacrophageInflammatoryProtein-3α,MIP-3α人巨噬细胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)规格：96T/48T rac (cis/trans)多奈哌齐N-氧化物  rac (cis/trans) Donepezil N-Oxide  质量规格：美国进口
英文名称HumanMacrophageInflammatoryProtein-3β,MIP-3β人巨噬细胞炎性蛋白-3β(MIP-3β)规格：96T/48T 6-O-去甲多奈哌齐  6-O-Desmethyl Donepezil  质量规格：美国进口
OverExpress C43(DE3) 感受态细胞100ul*10操作说明：
1. 0.1cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19；   --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。