OrigamiB(DE3) 感受态细胞100ul*10

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英文名 ：OrigamiB(DE3) 感受态细胞

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海博湖

保存条件 ：低温冷藏

规格 ：100ul*10

OrigamiB(DE3) 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
产品名称：OrigamiB(DE3) 感受态细胞100ul*10
规格：100ul*10
分类：表达感受态细胞
保存条件（保质期）：   -80℃（6个月）

OrigamiB(DE3) 感受态细胞100ul*10注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3.  当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
人间充质干细胞-脐带 Human盐酸文拉法辛（标准品）Venlaine hydrochloride质量规格：>98%,标准品
TPST1 Others Human 人 TPST1 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸文拉法辛Venlaine hydrochloride质量规格：>98%,BR
杂交瘤(B类);IB3C10H12A12G2H8F3原卟啉IXProtoporphyrin IX质量规格：>95%
BST2 Others Human 人 TETHERIN / BST2 / CD317 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲磺酸罗哌卡因（标准品）Ropivacaine mesylate质量规格：HPLC>98%,标准品
原代上皮细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1ml甲磺酸罗哌卡因Ropivacaine mesylate质量规格：>98%,BR
TM4(正常小鼠Sertoli细胞) 5×106cells/瓶×2贝美格（标准品）3-ETHYL-3-METHYLGLUTARIMIDE质量规格：含量测定
Hs 746T(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞 腺病毒转化的人胚肾细胞;AAV-293地喹氯铵（标准品）Dequalinium chloride质量规格：含量测定
人干细胞因子单克隆抗体细胞株;AMS2(SCF3)硫酸氢小檗碱（标准品）BERBERINE ACID SULFATE质量规格：含量测定
CD6 Others Rat 大鼠 CD6 / TP120 人细胞裂解液 (阳性对照) 度米芬（标准品）Domiphen bromide质量规格：HPLC法含量测定
CM-H026人淋巴内皮细胞完全培养基100mL醋酸优力司特；醋酸乌利司他Ulipristal acetate质量规格：>98%,BR
盐酸甲氯芬酯(标准品)  Meclofenoxate HCl  质量规格：含量测定 RatProstaticAcidPhosphatase,PAPELISA试剂盒大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
醋酸甲地孕酮  Megestrol Acetate  质量规格：>98%,BR,USP31 RatproteinkinaseB,PKBELISAKit大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒规格：96T/48T
醋酸甲地孕酮（标准品）  Megestrol Acetate  质量规格：HPLC>98%,标准品 RatproteinkinaseB,PKBELISA试剂盒大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒规格：96T/48T
美拉诺坦II；MTII  Melanotan ⅡAcetate  质量规格：>98%,BR RatProteinPhosphatase,PPELISAKit大鼠蛋酸酶(PP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
美洛昔康  Meloxicam  质量规格：>99% RatProteinPhosphatase,PPELISA试剂盒大鼠蛋酸酶(PP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
美洛昔康（标准品）  Meloxicam  质量规格：HPLC>98%,标准品 RatP-SelectinELISAKit大鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA试剂盒规格：96T/48T
盐酸美金刚胺  Memantine HCl  质量规格：>99% RatP-SelectinELISA试剂盒大鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA试剂盒规格：96T/48T
盐酸美金刚（标准品）  Memantine hydrochloride  质量规格：含量测定 Ratpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISAKit大鼠交联物(PY)ELISA试剂盒规格：96T/48T
甲氨蝶呤  Methotrexate  质量规格：>99%,BR Ratpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISA试剂盒大鼠交联物(PY)ELISA试剂盒规格：96T/48T
甲氨蝶呤（标准品）  Methotrexate  质量规格：HPLC>99%,标准品 RatPyridinoline,PYDELISAKit大鼠酚(PYD)ELISA试剂盒规格：96T/48T
OrigamiB(DE3) 感受态细胞100ul*10RatProstaticAcidPhosphatase,PAP大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 盐酸甲氯芬酯  Meclofenoxate HCl  质量规格：≥98%,BR
RatProstaticAcidPhosphatase,PAPELISA试剂盒大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 盐酸甲氯芬酯(标准品)  Meclofenoxate HCl  质量规格：含量测定
RatproteinkinaseB,PKB大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒规格：96T/48T 醋酸甲地孕酮  Megestrol Acetate  质量规格：>98%,BR,USP31
RatproteinkinaseB,PKBELISA试剂盒大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒规格：96T/48T 醋酸甲地孕酮（标准品）  Megestrol Acetate  质量规格：HPLC>98%,标准品
RatProteinPhosphatase,PP大鼠蛋酸酶(PP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 美拉诺坦II；MTII  Melanotan ⅡAcetate  质量规格：>98%,BR
RatProteinPhosphatase,PPELISA试剂盒大鼠蛋酸酶(PP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 美洛昔康  Meloxicam  质量规格：>99%
RatP-Selectin大鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA试剂盒规格：96T/48T 美洛昔康（标准品）  Meloxicam  质量规格：HPLC>98%,标准品
RatP-SelectinELISA试剂盒大鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA试剂盒规格：96T/48T 盐酸美金刚胺  Memantine HCl  质量规格：>99%
Ratpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PY大鼠交联物(PY)ELISA试剂盒规格：96T/48T 盐酸美金刚（标准品）  Memantine hydrochloride  质量规格：含量测定
Ratpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISA试剂盒大鼠交联物(PY)ELISA试剂盒规格：96T/48T 甲氨蝶呤  Methotrexate  质量规格：>99%,BR
OrigamiB(DE3) 感受态细胞100ul*10操作说明：
1. 0.1cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19；   --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。