Origami2(DE3) 感受态细胞100ul*10

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英文名 ：Origami2(DE3) 感受态细胞

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海博湖

保存条件 ：低温冷藏

规格 ：100ul*10

同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
产品描述：

产品名称	包装	分类
Origami2(DE3) 感受态细胞100ul*10	100ul*10	表达感受态细胞

Origami2(DE3) 感受态细胞100ul*10注意事项：
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。 
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。 
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2F8盐酸小檗碱,盐酸黄连素Berberine hydrochloride质量规格：≥97%(T)，BR
DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸小檗碱(标准品)Berberine hydrochloride质量规格：HPLC≥98%,标准品
LLC 小鼠肺癌细胞京尼平苷酸Geniposidic acid质量规格：HPLC≥98%
HBL-100人整合SV40基因的上皮细胞 HBL-100 iegration of SV40 gene in breast epithelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS京尼平苷酸(标准品)Geniposidic acid质量规格：HPLC≥98%,标准品
SHH Protein Human 重组人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 标签)原儿茶酸(标准品)3,4-Dihydroxybenzoic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品
人股骨成骨细胞HO-f倍他米Betamethasone质量规格：>98%
VP0 Others Human Eerovirus 71 人肠道病毒71型 VP0 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 倍他米（标准品）Betamethasone质量规格：HPLC>98% ,标准品
黄牛皮肤细胞;BTA-S2比阿培南Biapenem质量规格：度>97%
V79-4细胞，中国仓鼠肺细胞 人直肠腺癌细胞系,HRC-99细胞 CM-R077大鼠血管外膜成纤维细胞完全培养基100mL比阿培南（标准品）Biapenem质量规格：HPLC>98%,标准品
大鼠肝癌细胞;RH-35胆红素(标准品)Bilibubin质量规格：UV≥98%，标准品
盐酸克林霉素(标准品)  Clindamycin HCl  质量规格：>800μg/mg,含量测定 冰冻切片组织CASPASE-3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
盐酸维拉帕米  Verapamil HCl  质量规格：>99%,USP32,BR,可用于细胞培养 冰冻切片组织CASPASE-4蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
盐酸维拉帕米（标准品）  Verapamil HCl  质量规格：HPLC>98%,标准品 冰冻切片组织CASPASE-5蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
霉酚酸; 麦考酚酸;MPA  Mycophenolic acid  质量规格：>98%,BR 冰冻切片组织CASPASE-6蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
霉酚酸; 麦考酚酸（标准品）  Mycophenolic acid  质量规格：HPLC>97%,标准品 冰冻切片组织CASPASE-7蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
阿莫西林/羟氨苄青霉素  Amoxicillin   质量规格：BR级，可用于细胞培养，度99%以上,三水合物,USP30 冰冻切片组织CASPASE-8蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
阿莫西林（标准品）  Amoxicillin   质量规格：含量测定 冰冻切片组织CASPASE-9蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
非诺贝特  Fenofibrate  质量规格：>99%,EP6.0 冰冻切片组织CDK2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
非诺贝特（标准品）  Fenofibrate  质量规格：HPLC>98%,标准品 冰冻切片组织CDK3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
丙磺舒  Probenecid  质量规格：>98%,BR 冰冻切片组织CDK4蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
Origami2(DE3) 感受态细胞100ul*10冰冻切片组织CASPASE-2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 盐酸克林霉素  Clindamycin HCl  质量规格：>800μg/mg,USP,BR
冰冻切片组织CASPASE-3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 盐酸克林霉素(标准品)  Clindamycin HCl  质量规格：>800μg/mg,含量测定
冰冻切片组织CASPASE-4蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 盐酸维拉帕米  Verapamil HCl  质量规格：>99%,USP32,BR,可用于细胞培养
冰冻切片组织CASPASE-5蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 盐酸维拉帕米（标准品）  Verapamil HCl  质量规格：HPLC>98%,标准品
冰冻切片组织CASPASE-6蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 霉酚酸; 麦考酚酸;MPA  Mycophenolic acid  质量规格：>98%,BR
冰冻切片组织CASPASE-7蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 霉酚酸; 麦考酚酸（标准品）  Mycophenolic acid  质量规格：HPLC>97%,标准品
冰冻切片组织CASPASE-8蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 阿莫西林/羟氨苄青霉素  Amoxicillin   质量规格：BR级，可用于细胞培养，度99%以上,三水合物,USP30
冰冻切片组织CASPASE-9蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 阿莫西林（标准品）  Amoxicillin   质量规格：含量测定
冰冻切片组织CDK2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 非诺贝特  Fenofibrate  质量规格：>99%,EP6.0
冰冻切片组织CDK3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 非诺贝特（标准品）  Fenofibrate  质量规格：HPLC>98%,标准品
Origami2(DE3) 感受态细胞100ul*10操作方法：
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。