Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50

Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50

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品牌:博湖

货号:BH-G2131

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英文名 :Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海博湖

保存条件 :低温冷藏

规格 :100ul*50

Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3.   DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80以下,高于-80超期储存会导致转化效率会下降。
产品名称:Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50
规格:100ul*50
分类:表达感受态细胞
保存条件(保质期):   -806个月)


Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50操作说明:
1. 0.1cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. -80保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19   --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μFPC=200 ΩV=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml 37225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37培养箱过夜培养 13-17 小时。
293XL-hTLR9人胚肾细胞 Human embryonic kidney cell line 293XL-hTLR9 DMEM+10% Hyclone 灭活血清+10 μg/ml Blasticidin盐酸依匹斯汀Epinastine HCl质量规格:>98%,BR

BMP2 Protein Human 重组人 BMP-2 / BMP2A 蛋白盐酸依匹斯汀(标准品)Epinastine HCl质量规格:>99%,标准品
人滑膜细胞(HS)( 5×105 ) H9c2大鼠心肌细胞(ATCC来源) Rattus依普利酮Eplerenone质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养
杂交瘤(B);Z1510C6D10F4G6依普利酮(标准品)Eplerenone质量规格:HPLC>98%,标准品
人海马趾神经细胞(HN-h)(1×106)*度酸Etodolac质量规格:>98.5%,BR
JB6-C30细胞,小鼠皮肤细胞 J82(膀胱癌细胞) 犬肾细胞;MDCK/IgR苯并-15-5-(>98.0%(GC))Benzo-15-crown 5-Ether质量规格:>98.0%(GC)

EFNA1 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 标签)苯并-12-4-(>98.0%(GC))Benzo-12-crown 4-Ether质量规格:>98.0%(GC)
CAL-27(人舌鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 原代骨细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml苯并-18-6-(>96.0%(GC))Benzo-18-crown 6-Ether质量规格:>96.0%(GC)
人骨骼肌成肌细胞HSkMM12--4-(>95.0%(GC))12-Crown 4-Ether质量规格:>95.0%(GC)
CSNK1G2 Others Human CSNK1G2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 15--5-(>97.0%(GC))15-Crown 5-Ether质量规格:>97.0%(GC)
盐酸鲁拉西酮  Lurasidone HCl  质量规格:>99%,BR 兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA检测试剂盒rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 96T/48T

盐酸鲁拉西酮(标准品)  Lurasidone HCl  质量规格:HPLC>99%,标准品 兔子神经营养因子3(-3)ELISA检测试剂盒rabbitneuroophin3,-3ELISAKit 96T/48T
樱黄素(标准品)  Prunetin  质量规格:>98%,标准品 兔子神经营养因子4(-4)ELISA检测试剂盒rabbitneuroophin4,-4ELISAKit 96T/48T
香橙素(标准品)  Aromadendrin(Dihydrokaempferol)  质量规格:>98%,标准品 兔子肾上腺髓质素(ADM)ELISA检测试剂盒Rabbitadrenomedullin,ADMELISAKit 96T/48T
3',4',7-三羟基黄酮(标准品)  3',4',7-Trihydroxyflavone  质量规格:>97%,标准品 兔子生长激素释放多肽(GHRP)ELISA检测试剂盒RabbitGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 96T/48T
地克珠利  Diclazuril  质量规格:>95%,BR 兔子视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA检测试剂盒Rabbietinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit 96T/48T
美他环素,甲烯土霉素(标准品)  Metacycline HCl;Methacycline HCl  质量规格:分析标准品 兔子瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒rabbitLeptin,LEPELISAKit 96T/48T
美他环素,甲烯土霉素盐酸盐  Metacycline HCl;Methacycline HCl  质量规格:potency>877U per mg 兔子髓0脂碱性蛋白(MBP)ELISA检测试剂盒Rabbitmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 96T/48T
己二酸二  Adipic dihydrazide  质量规格:>98% 兔子透明质酸(HA)ELISA检测试剂盒rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit 96T/48T
alpha-亚麻酸(标准品)  Linolenic acid  质量规格:≥98.5%(GC),分析标准品 兔子脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA检测试剂盒rabbitDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISAKit 96T/48T
Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50兔子前列腺素E2(PGE2)ELISA检测试剂盒rabbitProstaglandinE2,PG-E2 96T/48T 钛黄;达旦黄;钛镍黄  Titan yellow  质量规格:BS

兔子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA检测试剂盒Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAP 96T/48T 双水杨酯;水杨酸-2-羧基苯酯  Sasapyrine  质量规格:>98%,BR
兔子神经生长因子(NGF)ELISA检测试剂盒rabbitNervegrowthfactor,NGF 96T/48T 双水杨酯 ;水杨酸-2-羧基苯酯  Sasapyrine  质量规格:>98%,BR
兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA检测试剂盒rabbitNeuron-specificenolase,NSE 96T/48T 盐酸鲁拉西酮  Lurasidone HCl  质量规格:>99%,BR
兔子神经营养因子3(-3)ELISA检测试剂盒rabbitneuroophin3,-3 96T/48T 盐酸鲁拉西酮(标准品)  Lurasidone HCl  质量规格:HPLC>99%,标准品
兔子神经营养因子4(-4)ELISA检测试剂盒rabbitneuroophin4,-4 96T/48T 樱黄素(标准品)  Prunetin  质量规格:>98%,标准品
兔子肾上腺髓质素(ADM)ELISA检测试剂盒Rabbitadrenomedullin,ADM 96T/48T 香橙素(标准品)  Aromadendrin(Dihydrokaempferol)  质量规格:>98%,标准品
兔子生长激素释放多肽(GHRP)ELISA检测试剂盒RabbitGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRP 96T/48T 3',4',7-三羟基黄酮(标准品)  3',4',7-Trihydroxyflavone  质量规格:>97%,标准品
兔子视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA检测试剂盒Rabbietinolbindingprotein4,RBP-4 96T/48T 地克珠利  Diclazuril  质量规格:>95%,BR
兔子瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒rabbitLeptin,LEP 96T/48T 美他环素,甲烯土霉素(标准品)  Metacycline HCl;Methacycline HCl  质量规格:分析标准品
Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

 

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