BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*10

BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*10

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品牌:博湖

货号:BH-G2118

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英文名 :BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海博湖

保存条件 :低温冷藏

规格 :100ul*10

产品名称:BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*10
规格:100ul*10
分类:表达感受态细胞
保存条件(保质期):   -806个月)


BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*10注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3.   DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80以下,高于-80超期储存会导致转化效率会下降。
BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*10操作说明:
1. 0.1cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. -80保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19   --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μFPC=200 ΩV=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml 37225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37培养箱过夜培养 13-17 小时。
大鼠胰腺外分泌腺细胞;AR42J野马追内酯B(标准品)Eupalinolide B质量规格:HPLC98%,标准品

IL12B Others Human IL12B / P40 人细胞裂解液 (阳性对照) 长春瑞滨(标准品)Vinorelbine质量规格:HPLC98%,标准品,长期不稳定
真皮成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105(1ml)1酸长春瑞滨(标准品)Vinorelbine tartrate质量规格:HPLC98%,标准品
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中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1硝呋太尔(标准品)Nifuratel质量规格:HPLC>99%,标准品
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IFNAR2 Others Human IFNAR2 / IFNABR 人细胞裂解液 (阳性对照) 去异丙氧基比索洛尔Des(isopropoxyethyl) Bisoprolol质量规格:美国进口
人骨髓间充质干细胞HMSC-bm4-(2-Hydroxy-3-isopropylaminopropoxy)benzoic Acid (Bisoprolol Metabolite)4-(2-Hydroxy-3-isopropylaminopropoxy)benzoic Acid (Bisoprolol Metabolite)质量规格:美国进口
IL12B Others Marmoset 狨猴 IL12B / IL-12B 人细胞裂解液 (阳性对照) N-去丁基布比卡因N-Desbutyl Bupivacaine质量规格:美国进口
非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-布替萘芬Butenafine质量规格:美国进口
盐酸普罗托平; 盐酸蓝堇碱 HPLC98% 20mg RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISA试剂盒大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒规格:96T/48T

脱水淫羊藿素 HPLC98% 20mg Ratleoopichormone,LHELISAKit大鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
去氢丹参新酮 HPLC98% 20mg Ratleoopichormone,LHELISA试剂盒大鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
伪石蒜碱 HPLC98% 20mg RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit大鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA试剂盒规格:96T/48T
β常春藤素 HPLC98% 20mg RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISA试剂盒大鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA试剂盒规格:96T/48T
苯甲酰新乌头原碱盐酸盐 HPLC98% 20mg RatLeptin,LEPELISAKit大鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
毛萼晶A HPLC95% 20mg RatLeptin,LEPELISA试剂盒大鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
脱氢枞醇 HPLC95% 20mg RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
异牡荆黄素 HPLC98% 20mg RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISA试剂盒大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
尾叶香茶菜戊素 HPLC95% 20mg RatLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit大鼠钩端螺旋体IgG(LepIgG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
BL21-Star(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*10RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRH大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒规格:96T/48T 醉鱼草皂甙IV HPLC98% 20mg

RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISA试剂盒大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒规格:96T/48T 盐酸普罗托平; 盐酸蓝堇碱 HPLC98% 20mg
Ratleoopichormone,LH大鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒规格:96T/48T 脱水淫羊藿素 HPLC98% 20mg
Ratleoopichormone,LHELISA试剂盒大鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒规格:96T/48T 去氢丹参新酮 HPLC98% 20mg
RatLeptieceptor,LR/Ob-R大鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA试剂盒规格:96T/48T 伪石蒜碱 HPLC98% 20mg
RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISA试剂盒大鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA试剂盒规格:96T/48T β常春藤素 HPLC98% 20mg
RatLeptin,LEP大鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 苯甲酰新乌头原碱盐酸盐 HPLC98% 20mg
RatLeptin,LEPELISA试剂盒大鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 毛萼晶A HPLC95% 20mg
RatLeptinSolubleReceptor,sLR大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒规格:96T/48T 脱氢枞醇 HPLC95% 20mg
RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISA试剂盒大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒规格:96T/48T 异牡荆黄素 HPLC98% 20mg
 

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