Stable 感受态细胞100ul*10

Stable 感受态细胞100ul*10

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品牌:博湖

货号:BH-G2070

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英文名 :Stable 感受态细胞

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海博湖

保存条件 :低温冷藏

规格 :100ul*10

同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
产品描述:
产品名称 包装 分类
Stable 感受态细胞100ul*10 100ul*10 克隆感受态细胞


Stable 感受态细胞100ul*10注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。 
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。 
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。

NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2抑霉唑(标准品) Imazalil质量规格:分析标准品
CNE(人鼻咽癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0134KU812(人外周血嗜碱性白血病细胞)5×106cells/瓶×2 杂交瘤(B);Z1510A2G6A2C7春雷霉素盐酸盐(标准品)Kasugamycin hydrochloride质量规格:分析标准品,90% (HPLC)
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2标准溶液(10μg/ml,u=4%Kitazine solution质量规格:10μg/ml,u=4%
ERN1 Others Human ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 利谷隆(标准品) Linuron质量规格:分析标准品
滑膜细胞Many types of cells包装:5 × 105(1ml)苯噻草胺(标准品)Mefenacet质量规格:分析标准品,98.5%
Hep 3B(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2垂体腺苷酸环化酶激活肽-27,人,小鼠,绵羊,猪,大鼠PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)质量规格:>95%,BR

AGRP Others Human AgRP 人细胞裂解液 (阳性对照) 垂体腺苷酸环化酶激活肽-276-27),人,鸡,小鼠,猪,大鼠PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)质量规格:>95%,BR
人角膜上皮细胞HCEpiC垂体腺苷酸环化酶激活肽-3816-38),人,鸡,小鼠,绵羊,猪,大鼠PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)质量规格:>95%,BR
SECTM1 Others Human SECTM1 / K12 人细胞裂解液 (阳性对照) 垂体腺苷酸环化酶激活肽相关肽(1-29),大鼠PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)质量规格:>95%,BR
HMy2.CIR B 淋巴母细胞胰多肽,人Pancreatic Polypeptide,human质量规格:>95%,BR
异落新妇苷 HPLC95% 20mg RatleukoieneE4,LT-E4ELISA试剂盒大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA试剂盒规格:96T/48T

鹅掌楸碱 HPLC95% 20mg Ratlipolysaccharidebindingprotein,LBPELISAKit大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
无根藤辛 HPLC95% 20mg Ratlipolysaccharidebindingprotein,LBPELISA试剂盒大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
五脂素A HPLC98% 20mg Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
苦木西碱J HPLC95% 20mg Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA试剂盒大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
棕鳞矢车菊黄酮素 HPLC95% 20mg Ratlipoproteinlipase,LPLELISAKit大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
反式可母尼醇,湿地松醇 HPLC95% 20mg Ratlipoproteinlipase,LPLELISA试剂盒大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
灵芝酸S HPLC98% 20mg Ratlipoproteinα,Lp-αELISAKit大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
灵芝萜酮二醇 HPLC98% 20mg Ratlipoproteinα,Lp-αELISA试剂盒大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
(betaD吡喃葡萄糖氧基)水杨酸甲酯 HPLC95% 20mg RatL-LactateDehydrogenase,L-LDHELISAKit大鼠L-鼠乳酸脱氢酶(L-LDH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Stable 感受态细胞100ul*10RatleukoieneE4,LT-E4大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 马兜铃内酰胺BIII HPLC95% 20mg

RatleukoieneE4,LT-E4ELISA试剂盒大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 异落新妇苷 HPLC95% 20mg
Ratlipolysaccharidebindingprotein,LBP大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 鹅掌楸碱 HPLC95% 20mg
Ratlipolysaccharidebindingprotein,LBPELISA试剂盒大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 无根藤辛 HPLC95% 20mg
Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒规格:96T/48T 五脂素A HPLC98% 20mg
Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA试剂盒大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒规格:96T/48T 苦木西碱J HPLC95% 20mg
Ratlipoproteinlipase,LPL大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒规格:96T/48T 棕鳞矢车菊黄酮素 HPLC95% 20mg
Ratlipoproteinlipase,LPLELISA试剂盒大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒规格:96T/48T 反式可母尼醇,湿地松醇 HPLC95% 20mg
Ratlipoproteinα,Lp-α大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T 灵芝酸S HPLC98% 20mg
Ratlipoproteinα,Lp-αELISA试剂盒大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T 灵芝萜酮二醇 HPLC98% 20mg
Stable 感受态细胞100ul*10操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

 

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