XL2-Blue 感受态细胞100ul*10

XL2-Blue 感受态细胞100ul*10

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品牌:博湖

货号:BH-G2026

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库存 :45

英文名 :XL2-Blue 感受态细胞

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海博湖

保存条件 :低温冷藏

规格 :100ul*10

同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
产品描述:
产品名称 包装 分类
XL2-Blue 感受态细胞100ul*10 100ul*10 克隆感受态细胞


XL2-Blue 感受态细胞100ul*10注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。 
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。 
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。

猪肾传代细胞;IBRS-2皂土(膨润土)(Bentone SD-1,适于中至低极性溶剂)Bentonite质量规格:Bentone SD-1,适于中至低极性溶剂
CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人细胞裂解液 (阳性对照) 皂土(膨润土)(Bentone SD-2,适于中高极性溶剂)Bentonite质量规格:Bentone SD-2,适于中高极性溶剂
CL-0157MG-63(人骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2活性炭粉(AR,200,粉末状,褐色)Activated charcoal质量规格:AR,200,粉末状,褐色
L-M TK细胞,鼠胸腺激酶缺陷细胞株 B细胞淋巴瘤细胞系,BJAB细胞 小鼠肝癌细胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]活性炭(CP,200,粉末状,褐色)Activated charcoal质量规格:CP,200,粉末状,褐色
Ana-1(小鼠巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2活性炭颗粒(AR,20-50)Activated charcoal质量规格:AR,20-50
人口腔角质细胞裂解物HOKL蛋白酶1底物2m,荧光Caspase 1 Substrate 2m (ICE),fluorogenic; Ac-YVAD-AMC质量规格:>95%,BR

IGFBP6 Others Human IGFBP6 / IBP-6 人细胞裂解液 (阳性对照) 蛋白酶3底物1m,荧光Caspase 3 Substrate 1m(Apopain), fluorogenic; Ac-DEVD-AMC质量规格:>95%,BR
BRL-3A 大鼠正常肝细胞抗菌肽B;天蚕丝抗菌肽Cecropin B质量规格:>95%,BR
CL-0118HT-29(人结肠癌细胞)5×106cells/瓶×2卡律蝎毒素Charybdotoxin质量规格:>95%,BR
人绒毛间充质成纤维细胞促皮质素释放因子,绵羊Corticotropin Releasing Factor,ovine质量规格:>95%,BR
增甘磷(>97.0%(T))  Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid)  质量规格:>97.0%(T) 人胞质动力蛋白(CD)免疫试剂盒 Human cytoplasmic dynein,CD ELISA kit

N-甲基亚氨二乙酸(>98.0%(GC)(T))  N-Methyliminodiacetic Acid  质量规格:>98.0%(GC)(T) 人本周蛋白(BJP)免疫试剂盒 Human Bence-Jones protein,BJP ELISA Kit
氮基三乙酸二钠盐(>99.0%(T))  Nitrilotriacetic Acid Disodium Salt  质量规格:>99.0%(T) 人苯氨酸(LPA)ELISA检测试剂盒HumanL-phenylalanine,LPAELISAKit 96T/48T
N-(2-羧乙基)亚氨基二乙酸(>98.0%(T))  N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acid  质量规格:>98.0%(T) 人苯诺龙/苯去甲睾酮(NP)免疫试剂盒 Human Nandrolone Phenylpropionate,NP ELISA Kit
三乙四胺-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T))  Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic Acid  质量规格:>98.0%(T) 人鼻病毒(RV)抗体(IgA)免疫试剂盒 Human rhinovirus(RV)aibody(IgA)ELISA kit
TAN[=1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚](>99.0%(T))  TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]  质量规格:>99.0%(T) 人吡哆/吡哆醇维生素B60酸酶(PDXP)免疫试剂盒 human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase,PDXP ELISA Kit
二甲基偶氮磺III  Dimethylsulfonazo III  质量规格:碱性稀土金属用的分光光度试剂及硫酸根用钡的沉淀滴定指示剂 人吡哆/吡哆醇维生素B6激酶(PDXK)免疫试剂盒 human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-kinase,PDXK ELISA Kit
偶氮磺III(>90.0%(HPLC))  Sulfonazo III   质量规格:>90.0%(HPLC) 人臂板蛋白3A(Sema 3A)免疫试剂盒 Human Sema 3A ELISA Kit
2-(4-磺基苯偶氮)-1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸三钠盐水合物(>95.0%(HPLC))  3sodium 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate  质量规格:>95.0%(HPLC) 人臂板蛋白3F(S3F)免疫试剂盒 Human S3F ELISA Kit
2,2'-二羟基偶氮苯(>98.0%(T))  2,2'-Dihydroxyazobenzene  质量规格:>98.0%(T) 人臂板蛋白4C(Sema 4C)免疫试剂盒 Human Sema 4C ELISA Kit
XL2-Blue 感受态细胞100ul*10人胞浆免疫球蛋白(CIg)ELISA检测试剂盒Humancytoplasmicimmunoglobulin,CIg 96T/48T CPC一水合物(=西吡氯铵一水合物)(>98.0%(HPLC)(T))  CPC Monohydrate (=Cetylpyridinium Chloride Monohydrate)  质量规格:>98.0%(HPLC)(T)

人胞浆型0脂酶A2-α(cPLA2-α)免疫试剂盒 Human cytosolic phospholipase A2-α,cPLA2-α ELISA Kit 百里酚酞氨羧络合剂  Thymolphthalein Complexon  质量规格:螯合剂
人胞外超氧化物歧化酶(SOD3)免疫试剂盒 Human Exacellular superoxide dismase [Cu-Zn](SOD3)ELISA kit 钙黄绿素蓝(>98.0%(T))  Calcein Blue  质量规格:>98.0%(T)
人胞质动力蛋白(CD)免疫试剂盒 Human cytoplasmic dynein,CD ELISA kit 增甘磷(>97.0%(T))  Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid)  质量规格:>97.0%(T)
人本周蛋白(BJP)免疫试剂盒 Human Bence-Jones protein,BJP ELISA Kit N-甲基亚氨二乙酸(>98.0%(GC)(T))  N-Methyliminodiacetic Acid  质量规格:>98.0%(GC)(T)
人苯氨酸(LPA)ELISA检测试剂盒HumanL-phenylalanine,LPA 96T/48T 氮基三乙酸二钠盐(>99.0%(T))  Nitrilotriacetic Acid Disodium Salt  质量规格:>99.0%(T)
人苯诺龙/苯去甲睾酮(NP)免疫试剂盒 Human Nandrolone Phenylpropionate,NP ELISA Kit N-(2-羧乙基)亚氨基二乙酸(>98.0%(T))  N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acid  质量规格:>98.0%(T)
人鼻病毒(RV)抗体(IgA)免疫试剂盒 Human rhinovirus(RV)aibody(IgA)ELISA kit 三乙四胺-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T))  Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic Acid  质量规格:>98.0%(T)
人吡哆/吡哆醇维生素B60酸酶(PDXP)免疫试剂盒 human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase,PDXP ELISA Kit TAN[=1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚](>99.0%(T))  TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]  质量规格:>99.0%(T)
人吡哆/吡哆醇维生素B6激酶(PDXK)免疫试剂盒 human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-kinase,PDXK ELISA Kit 二甲基偶氮磺III  Dimethylsulfonazo III  质量规格:碱性稀土金属用的分光光度试剂及硫酸根用钡的沉淀滴定指示剂
XL2-Blue 感受态细胞100ul*10操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

 

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