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文献和实验
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保质期 :一年
保存条件 :2-8℃避光保存。长期不用的分装后于-20℃避光保存,避免反复冻融
规格 :500T/1000T
产品简介:MTS细胞增殖与毒性检测试剂盒是应用新型的水溶性甲臢化合物[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(金翁),内盐;MTS]快速高灵敏度检测细胞增殖和细胞毒性的比色检测产品。
MTS被细胞生物还原成一种可溶于组织培养基的甲臢化合物,新陈代谢活跃的活细胞内的脱氢酶类将MTS转化成液态可溶的甲臢化合物,这种甲臢化合物在490nm的吸收值可以直接在96孔板上测量,而不需要另外作处理。由490nm测量的吸收值所表示的甲臢产物的数量与培养物中活性细胞的数量成正比。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数量呈线性关系。
MTS溶液可以直接加入到细胞样品中,不需要预配各种成分,MTS溶液很稳定,对细胞没有毒性,可以长时间孵育细胞。MTS法测定细胞增殖或毒性试验中活细胞数目的灵敏度高,无放射性,检测细胞增殖实验的灵敏度比其它方法如MTT, XTT和WST-1高。
www.sabbiotech.com
活性测定使用方法:
1、收集细胞,加细胞悬液100ul(约5000-10000个细胞)到96孔板(边缘孔用无菌水或PBS填充)。每板设对照(加100ml培养基)。
2、置37℃,5% CO2孵育过夜,倒置显微镜下观察。
3、每孔加入10 ul 待检测药物溶液, 37℃孵育。
4、每孔加入10 ul MTS溶液,37℃孵育1-4 小时。
5、测定490 nm各孔的吸光值。
5、同时设置空白孔(培养基和MTS溶液,无细胞),对照孔(不加药培养基和MTS溶液,有细胞),每组设定3-5复孔。
结果分析 :
细胞活力计算:
将各测试孔的OD值减去调零孔OD值或对照孔OD值。各重复孔的OD值取平均数。
细胞活力% =(加药细胞OD-空白OD/对照细胞OD-空白OD)×100
数量测定使用方法:
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2、按比例 (例如:1/2比例) 依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
3、接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加MTS试剂培养一定时间后测定O.D值,制作出一条以细胞数量为横坐标 (X轴),O.D值为纵坐标 (Y轴) 的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量 (使用此标准曲线的前提条件是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入MTS后的培养时间)。
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