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库存 :53
英文名 :BalbMulti PCR Mix
保质期 :长期
供应商 :北京百奥莱博科技有限公司
保存条件 :-20℃,避免反复冻融
规格 :1ml|5ml
特别提示:包括BalbMulti多重PCR Mix在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:BalbMulti多重PCR Mix
英文名称:BalbMulti PCR Mix
产品货号:WE0117
产品规格:1ml|5ml
BalbMulti PCR Mix浓度为2×,是由BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系。使用本产品无需进行繁杂的PCR反应条件的优化过程,只需进行简单的条件摸索即可轻松进行多重 PCR反应。本品中所含的BaldStar Taq DNA Polymerase是经化学修饰的热启动酶,可以有效减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异扩增。此酶与能提高反应特异性的PCR增强剂以及独特的缓冲体系相配合,使反应体系中所有的引物都能有效延伸,无需额外优化。此MasterMix中还包含GC Enhancer,有助于实现“困难”模板(比如高GC含量的模板)的高效扩增。BalbMulti PCR Mix适用于各种类型的多重PCR反应,比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。
产品组成:
组份 | 1ml | 5ml |
2×BalbMulti PCR Mix | 1ml | 5×1ml |
ddH2O | 1ml | 5×1ml |
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、2~8℃存放三个月,活性无明显改变。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
2×BalbMulti PCR Mix | 25μl | 1× |
Primer Mix,10μM each | 1μl | 0.2μM |
Template DNA | 适量 | |
ddH2O | up to 50μl |
注意:引物设计时,尽量减小各引物的Tm间的差值,差值尽量控制在5℃以内。各引物浓度请以终浓度0.05-0.2μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性扩增时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 10min | |
变性 | 95℃ | 30s | 30-40个循环 |
退火 | 55-65℃ | 30s | |
延伸 | 72℃ | 1kb/min | |
终延伸 | 72℃ | 5min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品中所包含的BaldStar DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品在预变性95℃,10 min条件下实现酶的活化。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
我公司销售的BalbMulti多重PCR Mix优惠促销,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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