加强型RIPA裂解液  C1053+   厂家直销,提供OEM定制服务,大包装更优惠

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价格: ¥150 - 650

品牌:普利莱 品牌认证

货号:C1053+-100/500

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产品详情

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保存条件 : 4℃

保质期 :一年

英文名 :Enhanced RIPA Lysis Buffer

库存 :大量现货

供应商 :普利莱

CAS号 ://

规格 :500ml/100ml

描述: 加强型RIPA裂解液加强型对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分有较强裂解作用,是常用的细胞组织快速裂解液。使用加强型RIPA 裂解液特别适于提取膜蛋白以及western blot和大多数蛋白-蛋白相互作用的实验等。
                                                     
储存:4 ℃保存  12个月有效
制备细胞裂解产物
  1. 800g 4℃离心5分钟收集培养细胞,估计细胞离心后的体积(PCV, 106 cells=~20 ml, 107 cells =~100 ml PCV);
  2. 50-100 ml PCV加入5倍体积RIPA裂解缓冲液(250-500 ml,冰浴中放置10分钟,并每隔5分钟在漩涡混合仪上振荡30秒;
  3. 12000g 4℃离心10分钟,将上清转移到新的离心管中,即得细胞总蛋白产物;
  4. 假如所得蛋白产物较为粘稠,95℃加热5分钟,然后迅速冰浴5分钟,12000g 4℃离心10分钟,将上清转移到新的离心管中,即得细胞总蛋白产物。
制备组织裂解产物
  1. 50-100 mg组织在冰上剪成碎片,用预冷的PBS洗涤2次离心弃去PBS
  2. 加入 0.5-1 ml 预冷 RIPA 裂解缓冲液;
  3. 4℃用玻璃匀浆器匀浆20-40次,直到95%的细胞被破碎,然后在冰浴中放置10分钟,并每隔5分钟在漩涡混合仪上振荡30秒;
  4. 12000g 4℃离心10分钟,将上清转移到新的离心管中,即得组织总蛋白产物;
  5. 假如所得蛋白产物较为粘稠,95℃加热5分钟,然后迅速冰浴5分钟,12000g 4℃离心10分钟,将上清转移到新的离心管中,即得组织总蛋白产物;
  6. 20%的甘油保存于 -70oC -20oC
注意:
  1. 在转移上清液时不要吸入底部的沉淀物;
  2. 在做免疫沉淀或免疫共沉淀时最好在实验前进行蛋白的提取,以避免某些不稳定蛋白的降解;
  3. 在该RIPA裂解缓冲液中未加入蛋白酶抑制剂。











     

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