GLASS Gel 蛋白电泳预制胶 Hepes-tris 常规装

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研选GLASS Gel 蛋白电泳预制胶 Hepes-tris 常规装

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专利凝胶和缓冲液配方,分辨率高,条带清晰,电泳效果极佳,保质期长,电泳时间短

产品详情

研选推荐

库存 :100

英文名 :Precast Gels Hepes-Tris, Regular Package

CAS号 :

保质期 :18个月

供应商 :上海万生昊天生物技术有限公司

保存条件 :4℃

规格 :10片/盒

产品图片:


产品简介:
GLASS gel 是美国EZBiolab公司在Prescast-EZgel预制胶基础上专门针对中国市场开发的高性能超低成本预制凝胶。具有如下特点:

● 专利凝胶和缓冲液配方,分辨率高,条带清晰,电泳效果好。
● 保存期长,4℃储存达到18个月。
● 胶夹打开极为轻松,只需用刀片在胶夹一侧轻轻划一下。拆胶演示
● 兼容市场上主流的mini电泳槽, 如BIORAD, Invitrogen,六一,天能和君意东方等。
● 凝胶中不含SDS,可用于变性及非变性电泳。
● 多种规格: 8%,10%,12%,15%,4-12%,4-15%,4-20%,8-20%等多种不同浓度; 10孔和15孔; 1.5mm胶厚度。
● 电泳时间短,在150V电压下, 电泳40-50分钟即可完成。
● 出售时免费附送足量的电泳缓冲液。
● 玻璃电泳板,蛋白吸附率低,电泳效果更好。
● 该产品与本公司的Instant-Bands配合使用,电泳结束即可看到结果!

预制胶选择指导:
产品编号 浓度 孔数 最大上样量 电泳缓冲液 转膜缓冲液 分离范围 建议电压
GSH2001-6T 6% 10孔 60μl Hepes-tris Tris-gly 300-30 KDa 150V
GSH2001-6F 6% 15孔 30μl Hepes-tris Tris-gly 300-30 KDa 150V
GSH2001-8T 8% 10孔 60μl Hepes-tris Tris-gly 200-40 KDa 150V
GSH2001-8F 8% 15孔 30μl Hepes-tris Tris-gly 200-40 KDa 150V
GSH2001-10T 10% 10孔 60μl Hepes-tris Tris-gly 160-20 KDa 150V
GSH2001-10F 10% 15孔 30μl Hepes-tris Tris-gly 160-20 KDa 150V
GSH2001-12T 12% 10孔 60μl Hepes-tris Tris-gly 85-10 KDa 150V
GSH2001-12F 12% 15孔 30μl Hepes-tris Tris-gly 85-10 KDa 150V
GSH2001-15T 15% 10孔 60μl Hepes-tris Tris-gly 50-10 KDa 150V
GSH2001-15F 15% 15孔 30μl Hepes-tris Tris-gly 50-10 KDa 150V
GSH2001-412T 4-12% 10孔 60μl Hepes-tris Tris-gly 200-15 KDa 150V
GSH2001-412F 4-12% 15孔 30μl Hepes-tris Tris-gly 200-15 KDa 150V
GSH2001-415T 4-15% 10孔 60μl Hepes-tris Tris-gly 200-10 KDa 150V
GSH2001-415F 4-15% 15孔 30μl Hepes-tris Tris-gly 200-10 KDa 150V
GSH2001-420T 4-20% 10孔 60μl Hepes-tris Tris-gly 200-3.5 KDa 150V
GSH2001-420F 4-20% 15孔 30μl Hepes-tris Tris-gly 200-3.5 KDa 150V
GSH2001-816T 8-16% 10孔 60μl Hepes-tris Tris-gly 200-5 KDa 150V
GSH2001-816F 8-16% 15孔 30μl Hepes-tris Tris-gly 200-5 KDa 150V
GSH2001-820T 8-20% 10孔 60μl Hepes-tris Tris-gly 200-6.5 KDa 150V
GSH2001-820F 8-20% 15孔 30μl Hepes-tris Tris-gly 200-6.5 KDa 150V

使用说明:
预制胶本身都不含SDS,可根据电泳缓冲液的不同用于变性电泳和非变性电泳
非变性胶(Native-PAGE)
1.非变性胶的蛋白迁移率受到蛋白分子量、蛋白空间结构等多种因素影响。
2.将GLASS Gel® Hepes-Tris gel预制胶从包装袋中取出。
3.将预制胶固定在电泳槽中。
4.准备非变性电泳缓冲液:万生昊天Hepes Running Buffer for Native PAGE (Cat.#:NEZB2001)。该产品含10包电泳缓冲液粉末,每包粉末可用500ml ddH2O去离子水)进行溶解,得到500ml 1X 电泳液。
5.内槽加满电泳液,外槽的电泳液最低须加到1/3液面处,不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出,用移液器吸取电泳液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的储存缓冲液。
6.上样:将非变性蛋白样品与5×非变性loading buffer(ES005)进行4:1混合均匀。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。
7.电泳条件:150 V, 60 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。
8.电泳结束,取出凝胶。用刀在侧边胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料,即可打开玻璃板,取胶时,需在凝胶和玻璃条之间,沿着玻璃条划一刀,防止取胶时,发生粘连使胶破碎。使用美工刀时请注意安全)
9.酸性蛋白(等电点pI<7)正常上样电泳即可。反之,碱性蛋白(等电点pI>7)带正电荷,需将电极插反(红插黑,黑插红),这时上样孔成为正极,样品向下电泳。

变性胶(SDS-PAGE)
1.请参考分离图谱选择合适浓度的预制胶,以帮助您进行更好的蛋白电泳条带分离。
2.将GLASS Gel® Hepes-Tris gel预制胶从包装袋中取出。
3.将预制胶固定在电泳槽中。
4.准备电泳缓冲液:每盒胶赠送10包电泳缓冲液粉末,每包粉末可用500ml ddH2O去离子水)进行溶解,得到500ml 1X 电泳液。
5.内槽加满电泳液,外槽的电泳液最低须加到1/3液面处,不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出,用移液器吸取电泳液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的储存缓冲液。
6.上样:将蛋白样品与5×变性loading bufferES003)进行4:1混合均匀,加热处理。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变型造成漏液。
7.电泳条件:150 V, 40~50 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。
8.电泳结束,取出凝胶。用刀在侧边胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料,即可打开玻璃板,取凝胶时,需在胶和玻璃条之间,沿着玻璃条划一刀,防止取胶时,发生粘连使胶破碎。使用美工刀时请注意安全)

注意事项:
1.万生昊天的Hepes-tris gel预制胶使用的是中性的Hepes缓冲系统,请勿使用Tris-Glycine等其他电泳缓冲液进行电泳。
1.1.推荐使用万生昊天专门配制的变性Hepes Running Buffer(Cat.#:EZB2001)或非变性Hepes Running Buffer (Cat.#: NEZB2001)
1.2.也可根据说明书的配方自行配制。
2.如果需要蛋白条带更加清晰、平直,可降低电压至100-120V, 适当延长电泳时间。
3.电压为150V电泳时,1块胶的电流在110mA左右,2块胶的电流在220mA左右,随时间增加电流逐步降低。
4.如要重复使用电泳缓冲液,建议每次更换内槽电泳缓冲液,外槽根据电泳实际情况更换。为了保证最佳电泳效果,不建议重复使用电泳缓冲液。
5.湿转时120V恒压转膜60-90分钟。为达到更好的转膜效果,可以根据预制胶上残留的预染marker及膜上的预染marker确定转膜效率,并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白的分子量,凝胶浓度及转膜液中的甲醇浓度都会影响转膜效率。 大蛋白尽量选择低浓度的胶。
5.1.蛋白分子量100KD以上,建议甲醇浓度5%;
5.2.蛋白分子量10-100KD, 建议甲醇浓度10%;
5.3.蛋白分子量10KD以下,建议甲醇浓度20%-30%。
6.电泳结束后可以使用Tris-Glycine转膜液进行转膜。将凝胶浸泡在转膜液中10-15min, 使凝胶中的缓冲液得到充分平衡,再进行转膜。
7.上样时枪头不要过度插入梳孔,以免戳破凝胶造成漏液。
8.如需分离<10 KDa的蛋白,建议可以使用Cat#:GSH2001-420T尝试。 如要确保电泳结果, 建议使用Cat#:TCH2001-16.5T,Tricine体系预制胶。
9.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

电泳图:

引用文献:

名称:CoCl2诱导人肝窦内皮细胞缺氧模型特点

作者:张风; 王清兰; 刘成海; 陶艳艳

上海万生昊天生物技术有限公司

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