DEAE阴离子交换磁珠北京价格

库存 ：76

保质期 ：长期

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

保存条件 ：冷藏

规格 ：5ml/100ml/1000ml

特别提示：包括DEAE阴离子交换磁珠在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：DEAE阴离子交换磁珠
产品货号：CZ014
产品规格：5ml/100ml/1000ml

产品简介：
DEAE是一种弱阴离子交换磁珠，具有快速的磁响应性、丰富的离子交换能力和极高的蛋白结合能力。离子交换配基为二乙氨乙基(diethylaminoethyl，DEAE)，该配基在pH 3-12的工作范围内仍然能够保持稳定的高蛋白结合能力。
与传统柱层析纯化方式相比，DEAE磁珠无需对粗蛋白样品进行预处理(如：反复繁琐的离心，费时费力的过滤操作)，此外，无需控制流速及柱压，不需要昂贵的层析设备。对于熟练的操作者来说，在很短时间内就能完成高纯度目的蛋白的提取，且能轻松实现多个样品的平行处理，实现高通量的蛋白纯化。
保质期：在2～8℃可稳定保存，保质期2年。
注：1. 蛋白结合量与目标蛋白特性相关，此处仅作参考值；
2. 1 mL磁珠悬液中含有100 μL磁珠。
产品优势：
1. 磁响应速度快，减少操作时间
2. 磁珠具有良好的分散性和重悬性，提高操作的便捷性
3. 配基具有良好的物理化学稳定性，提高了实验结果的可靠性及可重复性
操作流程(以纯化含BSA蛋白样品为例)：
1. 磁珠预处理(平衡)：将DEAE磁珠漩涡振荡30 s，使磁珠充分重悬；取一定量的10%(v/v)磁珠悬液置于50 mL离心管中。对磁珠悬液进行磁性分离，弃上清液，加入20 mL 平衡缓冲液洗涤磁珠3次，每次垂直混合2 min。
注：为了获得目标蛋白的zuì大回收率，实验者需要加入过量的DEAE磁珠，一般大于蛋白结合量的20%即可。对于含较低丰度目标蛋白的样品中，磁珠对目标蛋白的回收率会有所降低，因此需要继续增大磁珠的用量；
2. 蛋白吸附：将预处理的磁珠加入含BSA蛋白的样品溶液中，漩涡振荡30 s，置于垂直混合仪混匀30～60 min，使样品和磁珠充分接触并吸附，然后进行磁性分离，移弃上清液。
注：为了更有效率的吸附结合物质，平衡缓冲液zuì好含有较低的离子强度，选择的pH值应该至少与目标蛋白的等电点相差一个pH单位，选定的盐缓冲液pH波动在0.5 pH以内。目标蛋白与磁珠的吸附时间与蛋白的本身属性有关。
3. 磁珠洗涤：加入20 mL的平衡缓冲液，漩涡振荡重悬磁珠30 s后进行磁性分离，移弃上清液；该操作重复3次。
4. 蛋白洗脱：在上述完成磁珠洗涤的离心管中加入适量的洗脱液进行蛋白洗脱。用移液器吹打或者涡旋振荡下迅速重悬，然后将离心管置于垂直混合仪混匀10～15 min后进行磁性分离，收集上清液至新的离心管中。洗脱方式主要有高盐浓度洗脱(含1-2 M的NaCl的平衡缓冲液)和低pH洗脱(选择低于目标蛋白等电点的pH范围即可)两种。
5. 磁珠再生：一般采用2 M NaCl溶液洗涤3～5次，然后用平衡缓冲液进行再平衡处理。磁珠多次使用后会有沉淀蛋白、强疏水性蛋白、脂蛋白等杂质非特异性吸附到磁珠上，为了保证磁珠的使用效率，建议进行在位清洗(CIP)。
6. 在位清洗(CIP)：依次采用 1.0 M NaOH、70%乙醇或30%异bǐng醇、纯化水洗涤磁珠2次；zuì后加入20%乙醇重悬磁珠，置于2～8℃保存。
注意事项：
1. 本产品不宜冷冻、干燥或离心操作。冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。
2. 在使用本产品前，请务必充分振荡或超声使磁珠保持均匀的悬浮状态。
3. 使用过程中可根据需求，用纯化水或缓冲液磁吸洗涤磁珠 2～3次，以去除保存液中乙醇。
4. 本产品需与磁性分离设备配套使用。
5. 盐浓度与pH值均会影响特异性蛋白的结合与洗脱，客户需自行摸索不同蛋白的结合和洗脱条件，以保证蛋白纯化量和纯度。
6. 本产品仅供研究使用。

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