长春模式动物制备与销售

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转基因小鼠制备

由客户提供转墓因质粒图谱、质粒D N A及真相关序列信息,研究院负责质粒鉴定、酶切线性化D N A制备、小鼠受精卵显微注射 、注射受精卵移植 、移植小鼠孕期观察饲 养、新生小鼠出生记录及生命维持 、编号及鼠尾基因组 D N A抽握、转基因阳性小鼠的 PC R鉴定等。

技术指标 :显微注射用受精卵采自 C 57 B L/ 6J (♀)与C BA (♂)的F l代 ;胚胎移植(受精卵输卵筐移植 ) 受体采用IC R代假孕母鼠 ;受精卵供体、受体及新生仔鼠均维持在SP F级小鼠饲养环境 ;获得转基因质粒六个月 内提供3只以上鼠龄4-6周的转基因阳性 小鼠( 杂合子Funder ),雌雄不限。 

 

全基因敲除小鼠模型制备

根据害户的需求进行打靶载体构建 ,由害户提供 目标基因的Ensembl序列号 ,并提出拟剔除区域 ;研究院科研人员设计打靶策略 ,并反馈害户 ,经害户确认后进行打靶载 体的构建及后续研发.研究院承诺提供3只以上阳性小鼠。
 

技术指标 :显微注射用受精卵采自 C 57 B L/ 6J (♀)与C BA(♂)的Fl代 ;胚胎移植( 受精卵输卵筐移植)受体采用ICR代假孕母鼠 ;受精卵供体、受体及新生仔 鼠均维持 在SP F级小鼠饲养环境 ;阳性小鼠需通过测序证实待敲基因的序列.
 

条件性基因敲除或敲入小鼠模型制备

根据害户的需求进行打靶载体构建 ,由害户提供 目标基因的Ensembl序列号 ,并提出 拟剔除(或敲入) 区域 ;研究院科研人员根据害户的需求确定fl ox或敲入片段插入的区 域 ,经认可后研究院科研人员设计打靶策略,并反馈害户,经害户确认后进行打靶载 体的构建及后续研发。研究院承诺提供3只以上阳性小鼠。
 

技术指标 :显微注射用受精卵采自C 57B L/6J(♀) 与C BA(♂)的F l代 ;胚胎移植(受精卵输卵雷移植)受体采用ICR代假孕母鼠 ;受精卵供体、受体及新生仔 鼠均维持在SP F级小鼠饲养环境.对于基因敲入、flox小鼠各阶段均需通过测序证实敲入基因的存在和序列正确。

 

 

原核/胞质注射

原核

原核/胞质注射可以用于对mRNA、普通小片段及大片段DNA、BAC(Bacterial Artificial Chromosome,细菌人工染色体)进行注射、以及相关DNA混合共注射。

囊胚注射

囊胚注射是用于对已打靶好的ES细胞进行囊胚注射,目的是为了得到嵌合率较高的小鼠,而且要求被注射进入的ES细胞能发育成生殖细胞。

由客户提供待注射物品,研究院负责小鼠胚胎的显微注射、胚胎移植、移植小鼠孕期观察饲养、嵌合体小鼠出生记录、生命维持等。

技术指标:

显微注射用胚胎取自C57BL/6J或ICR(由害户选择);胚胎移植(受精卵子宫内移植)受体采用ICR代假孕母鼠;胚胎供体 受体及新生仔鼠均维持在SPF级小鼠饲养环境。

 

模型小鼠胚胎冻存保种

由客户提供转基因或基因敲除雄鼠,研究院负责将该小鼠与超排的C57BL/6J交配,取桑惺胚阶段的胚胎,并采用玻璃化冷冻的方法进行胚胎冻存,保存在液氮中。

客户提供5-10只6-8周龄雄鼠(转基因阳性鼠或基因敲除杂台子/纯台子雄鼠),并提供基因修饰鼠基因型鉴定的引物及条件;研究院负责小鼠基因型复检(PCR方法),将超排后的4-6周龄C57BL/6J雌鼠与基因修饰雄鼠交配,取桑惺胚阶段的胚胎,每个国系冻存200枚桑惺胚阶段的胚胎。

 

小鼠胚胎操作及品系建立

本研究院还可进行小鼠卵子、 精子和胚胎的采集、东存和复苏;并可进行体外受精、显微受精、 克隆、 胚胎生物净化、 小鼠嵌合胚胎的制备和四倍体胚胎拯救等技术服务。收费标准视具体情况而定。

冻存小鼠胚胎复苏繁殖

冷冻保存的胚胎由害户运至研究院(液氮中运输),研究院按照客户提供的冻存及复苏方法,复苏胚胎,并将胚胎移植到假孕母鼠体内(输卵雷移植或子宫移植),仔鼠出生记录及基因型鉴定等。

技术指标:胚胎复苏并将胚胎移植到假孕母鼠ICR的子富(每侧移植6枚囊胚)内,受体鼠及新生鼠均维持在SPF级小鼠饲养环境中. 研究院保存的胚胎复苏后,提供5只以上SPF级转基因阳性鼠或基因剔除杂合子小鼠,雌雄不限;害户提供的冷冻胚胎复苏移植后,所高出生的仔鼠均提供给害户。

模式动物定制流程

 

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武汉贝茵莱生物科技有限公司

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联系人:黄经理

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