DIG-High Prime DNA标记及检测启动装II

General description

利用碱不稳定DIG-11-dUTP对DNA模板进行随机结合标记并对DIG标记的杂交物进行化学发光检测的便捷性试剂盒。该试剂盒的组装就是以便捷性为宗旨，提供即用型的CSPD并带有可用于简易应用的滴液装置、成品的封闭溶液以及DIG Easy Hyb颗粒。DIG-High Prime混合物包括稳定的Klenow酶、核苷酸、引物以及反应缓冲液，均包含在一种便捷性的试剂中。

默克生命科学致力于为您提供更环保的替代产品，以符合“绿色化学的12项原则”的一项或多项原则要求。该产品为一种安全的化学品。 相对于核酸放射性标记和检测，DIG系统是一种灵敏、高成本效益替代方法。现有的许多出版物证明了DIG系统的多功能性，因此使用放射性标记不再是杂交DNA标记的唯一选择。

Other Notes

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

包装

1个试剂盒包含7种组分。

Principle

DIG-High Prime DNA标记及检测启动装II使用（DIG），一种类固醇半抗原，对DNA探针进行标记用于杂交以及后续通过酶免疫检测的化学发光检测。“随机结合的”DNA标记方法首先由Feinberg和Vogelstein开发，基于将所有可能序列的寡核苷酸杂交至待标记的变性DNA。起始加入的DNA仅作为标记DNA的合成模板并在反应过程中不会降解，使得利用该方法能够对最低量的DNA（10 ng）进行标记。互补的DNA链通过Klenow聚合酶利用随机的寡核苷酸的3′-OH端作为引物进行合成。存在与反应中标记了DIG的修饰后脱氧核糖核苷三磷酸被插入至新合成的互补DNA链中。

Application

DIG-High Prime用于利用碱不稳定DIG-11-dUTP对DNA探针进行高效的随机引物标记。DIG标记的探针在一小时或过夜孵育后可被高产量的生成。DIG-High Primer标记DNA已用于多种杂交技术：
• Southern blots^[1]
• Northern blots^[2]
• 斑点印迹^[3]
• 克隆及菌斑杂交
• 用于所有类型的滤膜杂交
• 用于在总基因组DNA中的单拷贝基因检测，即便是来自具有高复杂性的物种，如,人、大麦和小麦