抗体粗纯化试剂盒

本试剂盒采用盐析法，该纯化方法是基于在待纯化血清中加入盐溶液，由于抗体也是一种蛋白质，其在水溶液中的溶解度是由其本身携带的亲水基团数和电荷数决定的，当向抗血清中加入饱和盐溶液后，盐离子与抗体竞争溶液中的水分子，因为盐离子与抗体分子相比，具有更强的亲水性，因此抗体分子表面的水化膜被破坏，同时其暴露出来的带电基团被溶液中的盐离子所中和进而导致其溶解度大大降低，依据此原理从而将其从抗血清中分离。

• 产品特点

1. 试剂盒内含有分析所需的所有必需试剂，操作简单便捷；
2. 试剂盒内组分经实验优化，确保更高的检测灵敏度；
3. 保存条件：2-8℃。
4. 规格：待纯化抗体1-5ml

三、所需材料
仪器：离心机、离心管（5mL、15 mL、50mL）
试剂：去离子水
四、 试剂盒组成

组成部分	装量
A液	10ml
B液	15ml
C液	5 mL

 

• 纯化步骤

1. 样品准备：将抗血清与A液预冷后按体积比1:2混合。
2. 盐析：将B液预冷，向上述混合溶液中加入等体积B液，边滴加边摇匀（在冰浴上进行），然后迅速转入离心机内离心，8000r/min离心5min。
3. 洗涤：去上清，将沉淀用去离子水清洗1遍（注意：切勿用水流冲洗沉淀）。
4. 复溶：迅速将洗涤后的沉淀用等体积C液溶解，得粗纯抗体。

• 注意事项

1. B液在冷藏条件下有晶体析出属正常现象。
2. A液和B液需要提前预冷，且粗纯过程在冰浴上进行。
3. 洗涤沉淀时水流沿沉淀反方向进入，沿沉淀方向流出。
4. 沉淀应及时复溶。
5. 将所纯化的抗体加入10%-20%的甘油置于-20摄氏度或者-80摄氏度即可长期保存。