膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒北京厂家

库存 ：93

英文名 ：Membrane protein and Cytoplasmic Protein Extraction Kit

保质期 ：一年

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

保存条件 ：蛋白酶抑制剂、蛋白稳定剂-20℃

规格 ：50T|100T

特别提示：包括膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒
英文名称：Membrane protein and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
产品货号：HR0019
产品规格：50T|100T

哺乳动物跨膜蛋白承担各种生物功能，在疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。
去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构，因而妨碍了膜蛋白的功能研究。
我司膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒是一种基于化学而非去污剂方法的高产膜蛋白提取试剂盒。本试剂盒提供全套试剂，适用于从细胞和动物组织提取膜蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。提取的膜蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

储存条件：蛋白酶抑制剂、蛋白稳定剂-20℃保存；蛋白提取液2-8℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2．将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒
使用注意事项：
1．旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3．蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
5．Western 实验内参可以选用Tubμlin、Na-K ATPase。
6．更多蛋白提取常见问题分析等资料可以联系本公司索取。

使用方法：
A．细胞蛋白提取
1．取5-10×106个以上细胞①，在4℃，500g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2．用冷PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3.细胞样品中加入200μl冷的试剂A，2μl蛋白酶抑制剂混合物，2μl蛋白稳定剂，高速涡旋振荡15秒，置冰上10-15分钟。
4．再次高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，13000×g条件下离心5分钟。
5．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，37℃水浴5-10分钟，37℃下②2000g离心5分钟，此时溶液分为两层(对着光线看)，下层约为20μl。
6．收集上层，即为胞浆蛋白③。
7．用150-200μl冰冷的试剂B稀释下层相，混匀后冰浴2min，37℃水浴5-10分钟，37℃下②2000g离心5分钟，此时溶液分为两层(对着光线看)，下层相约为20μl。
8．按步骤7 再次抽提下层相(此步骤可以选做)。
9．用80-200μl冰冷的试剂C 稀释下层相，即得膜蛋白。
10．将上述蛋白提取物定量③后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验④。
注：
①细胞数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
由于膜蛋白含量较少，需要较多的细胞才能保证得率。
② 必需保证在37℃左右下离心，至少确保30℃以上。无可控温的离心机时，用常温的离心机在室温离心即可，适当缩短离心时间至2-3分钟。
③用BCA法进行蛋白定量。
④蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。
B、组织蛋白提取
1．取适量组织样本剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体(或用液氮研磨)，冰上静置5分钟，小心将匀浆吸入另一预冷的干净离心管。
2.在4℃，500g条件下离心2-3分钟，弃上清。
3．按照细胞蛋白的提取方法的第3 步骤往下操作即可。
上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。
注：
①用液氮研磨的方法更佳，具体方法可以联系本公司hhsky1017@163.com 索取详细资料。

我公司销售的膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒北京厂家，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。