γδ T细胞高效扩增试剂盒

规格 ：2L/套

 产品简介

   γδT细胞具有在体内快速反应的特性，在受到刺激时，会先于αβ-T细胞释放促炎性细胞因子（IFN-γ和TNF-α等）。 

   γδT细胞能够激活NK细胞的肿瘤细胞毒作用，与DC细胞互刺激成熟， APC细胞抗原呈递的功能，激活αβ-T 细胞

   的免疫效应， γδT细胞的杀伤作用具有非MHC限制性，广泛的杀瘤谱，已知对至少十几种肿瘤细胞有杀伤作用。

   γδT细胞在人外周血含量很少（1-5%），本产品能够将外周血中的单个核细胞大规模扩增成γδT细胞，具有扩

   增效率高，目的细胞百分比高的特点，起始单个核细胞经过14天培养，总细胞数可以扩增约50-100倍左右， 

   γδT细胞数可以扩增500-1000倍，其纯度高于85%，并且全程无血清培养，为基础和临床研究使用γδT细胞提供

   一个有力的武器。

  产品特点

   1 扩增效率高：起始单个核细胞经过14天培养，总细胞可以扩增约50-100倍左右，目的细胞（γδT细胞）数可以

      扩增500-1000倍；

   2 目的细胞百分比高： γδT细胞纯度可以达到85%以上；

   3 全程无血清培养。 

  试剂盒成份

 使用说明

   1 在血液采集前一天将100μL GD-I试剂加入4mL PBS，包被于T-75瓶，用锡纸包好，平放于4°C冰箱过夜；

      注意： 确保T-175瓶平放以保证含有GD-I试剂的PBS溶液能够均匀分布于T-75瓶底。

   2 D0 用PBS溶液洗涤前一天包被的T-75瓶一次，将制备好的单个核细胞（MNC）按0.5-1M/mL细胞密度铺于洗涤后

      的T-75瓶中，加入GD-IV 47.5mL， GD-II 85μL，GD-III 2.5mL以及IL-2 1000U/mL；

      注意：1）洗涤时用移液管吸取20ml PBS注入T-75瓶，轻微震荡后倒出/吸出，切忌用冲力较大的移液器或移液

                           枪反复冲洗以免破坏包被面；

                    2）本试剂盒所配试剂均为整支加入，可先用移液枪移取试剂管中试剂后再用培养基冲洗试剂管确保管

                           内剩余试剂能够充分利用。

   3 D3 补加90mL GD-IV（含IL-2 1000U/mL）和10mL GD-III，转入细胞培养袋，此时袋子含150mL培养基；

   4 D5 往培养袋补加135mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和15mL GD-III，此时袋子含300mL培养液；

   5 D7 往培养袋补加270mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和30mL GD-III，此时袋子含600mL培养液；

   6 D9 每个培养袋补加460mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和40mL GD-III，此时袋子含1100mL培养液；

      注意： 确保T-175瓶平放以保证含有GD-I试剂的PBS溶液能够均匀分布于T-75瓶底。

   7 D12-14 收获γδT细胞。

培养效果

                               培养细胞14天后，细胞总数及目的细胞（γδ T cell）扩增倍数以及流式表型分析（N=4）

  产品保存

   1 本产品需避光保存；

   2 GD-I，GD-IV置于2-8°C保存，有效期为12个月，其它成份包括GD-II, GD-III置于-20°C保存，有效期为24个月；

   3 请于保质期内使用本产品，超过保质期，请勿使用；

   4 为确保本产品的质量，请避免对其反复冻融。