牛结核分枝杆菌PCR试剂盒

库存 ：36

英文名 ：Mycobacterium Bovis PCR Kit

保质期 ：一年

供应商 ：上海晅科生物科技有限公司

保存条件 ：-20℃±5℃，避光保存

规格 ：48T

牛结核分枝杆菌PCR试剂盒简介及特点：
牛分枝杆菌（Mycobacterium bovis）是引起牛结核病的主要病原体，旧称牛型结核分枝杆菌，对牛和其他家畜有致病性。形态，染色和生长特性与人型结核分枝杆菌基本相似。在抗原结构上，牛型菌株与人型菌株有共同抗原存在，因而可用减毒的牛分枝杆菌（即卡介苗）接种预防人的结核病。本菌能引起牛、马、猪的进行性和致死性结核病。对绵羊和山羊也可引起进行性结核病，但不常见。人对本菌也易感，特别是儿童，绝大多数病例受害部位为淋巴结和腹腔器官，肺部受侵害的不常见。因此牛分枝杆菌的检测具有重要的意义。本试剂盒根据PCR原理开发，它具有下列特点：

1.即开即用，用户只需要提供细菌DNA模板。
2.引物经过精心优化，专一性强，只扩增牛分枝杆菌。
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4.PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5.本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。 本产品只能用于科研。

规格及成分：

成  份	包装
PCR MagicMix 3.0	1 mL（亮黄盖）
超纯水	1 mL（蓝色）
超纯水	100 μL（白盖）
牛分枝杆菌PCR阳性对照 （1×10E8拷贝/ul）	50μL（黄盖）
核酸释放剂	20次（1ml，绿盖）
使用手册	1份

运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂

自备试剂：
样品DNA

牛结核分枝杆菌PCR试剂盒使用方法：
一、样品DNA的制备
（1）如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
（2）用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌DNAout或柱式细菌DNAout。本试剂盒免费赠送20次免DNA提取的DNA释放剂，本产品的裂解液可以直接作为PCR模板，省略了DNA提取步骤。其使用手册可咨询本公司客服索取。
二、设置PCR反应（40 μL体系）
（3）对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
 

成分	N+2个样品管	PCR阴性对照	PCR阳性对照
PCR MagicMix 3.0	各20 μL	20 μL	20 μL
牛分枝杆菌 PCR引物混合液	各2 μL	2 μL	2 μL
N+2个样品DNA模板	各18 μL	-	-
PCR阴性对照	-	18 μL	-
PCR阳性对照（用牛分枝杆菌PCR阳性对照的10000倍稀释液）	-	-	18 μL

（4）按下表设置PCR反应：
 

过程	温度		时间
预变性	94℃		5 min
PCR反应 （35个循环）	94℃		30 sec
	55℃		30 sec
	72℃		60 sec
最后延伸	72℃		10 min

三、电泳检测
（5）取10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为270bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。

牛结核分枝杆菌PCR试剂盒关联产品：
牛分枝杆菌可视化LAMP扩增试剂盒