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英文名 :咨询客服
CAS号 :咨询客服
库存 :库存
细胞类型 :咨询客服
品系 :小鼠
组织来源 :咨询客服
相关疾病 :咨询客服
物种来源 :咨询客服
免疫类型 :咨询客服
细胞形态 :咨询客服
器官来源 :咨询客服
运输方式 :顺丰快递
年限 :咨询客服
生长状态 :咨询客服
规格 :1ml/T25
AB2.2小鼠胚胎干细胞AB2.2细胞价格细胞接受后的处理:
1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
AB2.2小鼠胚胎干细胞AB2.2细胞价格
- 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的复苏
- 小鼠胚胎干细胞的复苏(以T25为例)
- 水浴锅37°C预热,将小鼠胚胎干细胞完全培养液温浴到37°C。
- 从液氮中取出冻存的小鼠胚胎干细胞,放入水浴锅中,快速晃动使管中的细胞尽快融化,仔细观察,待剩最后一块冰晶时,快速取出。
- 用75%酒精擦拭消毒冻存管口的外表面,在超净台中打开冻存管,将细胞冻存悬液转移至含有4ml完全培养基的离心管中,注意减少气泡的产生。
- 为了减少细胞损失,再往冻存管中加入1ml完全培养基,稍微吹打,收集至离心管中。
- 将细胞悬液离心1000rpm/5min。离心期间,将MEF细胞换用小鼠胚胎干细胞完全培养液。
- 离心后,去除上清,加入1ml小鼠胚胎干细胞完全培养液,,轻轻吹打混匀。
- 将小鼠胚胎干细胞按10000-40000个活细胞/cm2的密度接种到已经换好液的MEF细胞中,轻轻摇晃培养瓶,使细胞均匀分布。放入37°C,5%CO2的培养箱中培养。
- 复苏后第二天,给复苏的细胞换用新鲜的小鼠胚胎干细胞完全培养基(已37°C预热)。每天换液。
- 小鼠胚胎干细胞的传代
- 当小鼠胚胎干细胞的克隆较大,出现分化或即将分化;或者由于复苏或传代接种的密度的问题,即将出克隆间融合,就必须传代。
- 传代前准备,提前1-3天准备MEF细胞
- 将小鼠胚胎干细胞完全培养基,小鼠胚胎成纤维细胞完全培养液,0.25%胰酶(含ETDA),PBS 预热至37°C。
- 吸弃培养瓶的旧培养液,加入2ml PBS洗涤细胞,吸弃PBS,加1ml 0.25%胰酶覆盖细胞表面,消化,显微镜下观察,约70-80%左右的细胞变圆后,用手轻拍培养瓶的壁,使细胞脱落下来。
- 立即加入1ml 小鼠胚胎成纤维细胞完全培养液,终止消化。轻轻吹打混匀。
- 将细胞悬液转移到15ml 离心管中。1000rpm/5min。
- 离心期间,将MEF细胞换用小鼠胚胎干细胞完全培养液。
- 离心后,去除上清,加入1ml小鼠胚胎干细胞完全培养液,,轻轻吹打混匀。
- 将小鼠胚胎干细胞按10000-40000个活细胞/cm2的密度接种到已经换好液的MEF细胞中,轻轻摇晃培养瓶,使细胞均匀分布。放入37°C,5%CO2的培养箱中培养。
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