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文献和实验
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提供商 :武汉恒意赛生物
服务名称 :Real-Time PCR
规格 :PCS
实时定量PCR/Co-IP/ChIP服务
实时荧光定量PCR是在Life technologies公司的StepOne™ Real-Time PCR仪上完成,每个样品均作3个复孔,使用EnTurbo™ SYBR Green PCR SuperMix试剂盒进行(ELK Biotechnology,EQ001):
(1)反应程序为:预变性 95℃,3min
循环(40次) 95℃,10s→58℃,30s→72℃,30s
熔解曲线 仪器默认设置
(2)反应体系为:
试剂 | 使用量 |
2×Master Mix | 5.0 μL |
引物工作液(2.5μM) | 1.0 μL |
Template | 1.0 μL |
ddH2O | 2.0 μL |
Rox | 1.0 μL |
(3)、附录
1、数据分析方法
ΔΔCT法:
A=CT(目的基因,实验样本)- CT(内标基因,实验样本)
B=CT(目的基因,对照样本)- CT(内标基因,对照样本)
K=A-B
表达倍数=2-K
武汉恒意赛生物科技有限公司
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