文献支持异柠檬酸裂解酶（ICL）活性检测试剂盒 紫外分光光度法

异柠檬酸裂
解酶（ICL）活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC2030
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称	规格	保存条件
提取液	液体60 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂一	液体10 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂二	液体10 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂三	粉剂×2瓶	-20℃保存
试剂四	粉剂×2瓶	-20℃保存
试剂五	液体100μL×1支	2-8℃保存
试剂六	液体13mL×1瓶	2-8℃保存
试剂七	粉剂×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

1. 提取液：临用前将试剂七加入到提取液中，勿放于-20℃；
2. 试剂三：临用前取1瓶加入6.25mL蒸馏水，充分混匀待用；用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融；
3. 试剂四：临用前取1瓶加入6.6mL蒸馏水，充分混匀待用；用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融；
4. 试剂五：使用前需先离心。根据用量按照试剂五:蒸馏水为1:8的体积比例充分混匀，现用现配；
5. 工作液配制：按试剂一：试剂二：试剂三：试剂四：试剂五=145μL:175μL:210μL:210μL:15μL的比例将各试剂混合后备用（共755μL，1T的量），根据样本数量现用现配。

产品说明：
ICL（EC4.1.3.1）主要存在于植物和微生物中，油料作物种子在萌发过程中，通过乙醛酸循环及其他过程将脂肪转变成碳水化合物。ICL是乙醛酸循环的关键酶之一。
ICL催化异柠檬酸降解为乙醛酸和琥珀酸，乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD，NADH在340nm下有特征吸收峰，监测340nm吸光度的减小速率可间接反应ICL活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件

注意事项：

1. 测定过程中样本和所有试剂在冰上放置，以免变性和失活。
2. 比色皿中反应液的温度必须保持37℃或25℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃或25℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃或25℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。

相关发表文献：
[1] Sun J, Jia H, Wang P, et al. Exogenous gibberellin weakens lipid breakdown by increasing soluble sugars levels in early germination of zanthoxylum seeds[J]. Plant science, 2019, 280: 155-163.
参考文献：
[1] Maffei M, Bertea C M, Garneri F, et al. Effect of benzoic acid hydroxy-and methoxy-ring substituents during cucumber (Cucumis sativus L.) germination. I.: Isocitrate lyase and catalase activity[J]. Plant Science, 1999, 141(2): 139-147.
相关系列产品：
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