乙醇脱氢酶(ADH)活性检测试剂盒    紫外分光光度法

文献支持乙醇脱氢酶(ADH)活性检测试剂盒 紫外分光光度法

价格: ¥420

品牌:Solarbio 品牌认证

货号:BC1080

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产品详情

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保存条件 :-20℃

保质期 :6个月

英文名 :Alcohol Dehydrogenase(ADH) Activity Assay Kit

库存 :99

供应商 :北京索莱宝科技有限公司

CAS号 :BC1080-50T/48S

规格 :50管/48样


乙醇脱氢酶(ADH)活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC1080
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 规格 保存条件
提取液 液体60 mL×1瓶 2-8保存
粉剂一 粉剂×1 2-8保存
试剂一 液体45mL×1 2-8保存
试剂二 粉剂×2 -20℃保存
试剂三 液体6 mL×1瓶 2-8保存
溶液的配制:
  1. 提取液:临用前将粉剂一倒入提取液中,溶液为悬浊液,使用前需摇匀;
  2. 试剂二:临用取一支加入1.5mL蒸馏水,-20℃分装保存4周,避免反复冻融。
产品说明:
ADH是生物体内短链醇代谢的关键酶,催化乙醇与乙醛可逆转换,在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物ADH主要在肝脏生成,肝脏损伤导致ADH释放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否异常。
ADH催化NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+,NADH在340nm处有吸收峰,而NAD+没有;测定340nm 吸光度下降速率,来计算ADH活性。

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
冰、低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、水浴锅、可调式移液器、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件

实验实例:
  1. 取0.1g大鼠肝脏按照提取和测定步骤操作,测得计算ΔA空白管=A1-A2=0.558-0.557=0.001ΔA测定管=A3-A4=0.812-0.587=0.225,按样本质量计算酶活得:
ADH (U/g 质量) =1.61×(ΔA测定管–ΔA空白管)÷W=1.61×(0.225–0.001)÷0.1=3.6064U/g 质量。
  1. 取小鼠血浆直接检测,测得计算ΔA空白管=A1-A2=0.558-0.557=0.001ΔA测定管=A3-A4=0.708-0.676=0.032,按液体体积计算酶活得:
ADH (U/mL) =1.61×(ΔA测定管–ΔA空白管)=1.61×(0.032–0.001)=0.04991 U/mL
注意事项:
  1. A3大于1.5或者A3小于A1,则需要将样本用蒸馏水稀释再进行测定,计算公式注意乘以稀释倍数。
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