文献支持淀粉分支酶(SBE)试剂盒 微量法

淀粉分支
酶（SBE）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC1865
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称	规格	保存条件
提取液	液体50 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂一	液体10 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂二	粉剂×2支	2-8℃保存
试剂三	液体13 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂四	液体2.5 mL×1瓶	2-8℃保存

溶液的配制：

1. 试剂二：临用前取1支加入0.6mL蒸馏水，缓慢加热，逐渐升温至沸腾，使其充分溶解，2-8℃保存4周。

产品说明：
SBE（EC 2.4.1.18）主要存在于植物中，是参与支链淀粉合成的关键酶，测定SBE活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。
淀粉和碘结合后在660nm有特征光吸收，SBE可切断支链淀粉侧支，从而降低了淀粉-碘复合物在660nm吸收值，一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件

注意事项：

1. 可以在不同对照管中加入不同的样本，然后集中进行1min沸水浴处理。
2. 试剂一如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混匀。

实验实例：

1. 取约0.1g桃树叶片加入1mL提取液，冰浴中匀浆。15000g，4℃离心15min，取上清置冰上，之后按照测定步骤操作，用96孔板测得计算A对照管=0.399，A测定管=0.277，按样本质量计算酶活得：

SBE活性(U/g 质量)=（A对照管-A测定管）÷A对照管÷W×23.8=72.77 U/g 质量。
相关发表文献：
[1] Peitong Wang,Xi Chen,Xuan Xu,et al. Arsenate induced chlorosis 1/ translocon at the outer envolope membrane of chlooplasts 132 protects chloroplasts from Arsenic Toxicity. Plant physiology. October 2018;(IF6.305)
参考文献：
[1] Jiang H, Dian W, Wu P. Effect of high temperature on fine structure of amylopectin in rice endosperm by reducing the activity of the starch branching enzyme[J]. Phytochemistry, 2003, 63(1): 53-59.
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