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文献和实验
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服务名称 ：神经系统类疾病模型
提供商 ：深圳拓普生物
1. 背景
慢性不可预见性轻度应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)是建立抑郁症模型的方法之一。抑郁症是一种严重危害人类身心健康的精神障碍疾病，它严重影响了患者的日常工作和生活。抑郁症的成年患者临床上往往表现为情绪低落，兴趣缺乏，自我评价过低，不适当的内疚、绝望和自我仇恨，有些患者还可能出现食欲减少、体重下降、注意力不集中、失眠、记忆力减退、社会活动减少、性欲下降等，严重者甚至自杀。这些症状是慢性的，但随着时间的推移，复发频率逐渐增加，病情随每次复发而逐渐加重。虽然抑郁症的发病率逐年提高，然而其发病机制并不十分清楚，为探究其各种未知因素，需要建立可靠的动物模型。
2. 实验动物
成年雄性Wistar或者SD大鼠，体重为200～250g给予慢性不可预见性轻度应激。
3. 造模方法
实验大鼠单鼠单笼饲养，给予CUMS刺激。
CUMS抑郁模型制作方案如下：
①笼子倾斜45°，7h；②距鼠尾1cm处，夹尾1min；③禁食，24h；④禁水，24h；⑤4℃冷水游泳，5min；⑥黑白颠倒，24h；⑦200转/min水平摇晃，5min；⑧不同的噪声，6h；⑨放异物，12h；⑩潮湿垫料，12h；⑩不给予任何刺激，24h；⑩40℃热水游泳，5min。
以上的12种刺激随机安排到21d内，每日1种，每种刺激不能出现3次以上，同种刺激不能连续出现，使动物不能预料刺激的发生。第22天对所有动物进行行为学评价：旷场实验、强迫游泳实验(forced-swimming test)和1％蔗糖水偏好实验(1％ sucrose preference test，1％SPT)测定，处理前后若数据具有统计学差异(P<0.05)，则说明模型建立成功。
4. 大鼠抑郁症模型的行为学测试评价
4.1 1％蔗糖水偏好实验(1％SPT)测定
1％蔗糖水偏好等于1％蔗糖水消耗量(水消耗量+1％蔗糖水消耗量)。CUMS刺激开始前，要对所有实验大鼠进行糖水适应的训练，时间约为4d，将2瓶糖水放在笼子上24h后。
其中一瓶糖水用纯水替代，再放置24h，然后再禁食禁水24h，最后单鼠单笼，每个笼子上放一瓶约75ml的纯水和一瓶约75ml的1％蔗糖水，供大鼠1h内自由饮用。适应阶段结束后，进行21d的CUMS刺激。
第22天禁水、禁食23h，第24小时测定动物1h饮用1％蔗糖水的量。测定前后水瓶的质量差为动物1h饮用1％蔗糖水的量。1％蔗糖水消耗量以1％蔗糖水消耗量与水和蔗糖消耗量之和的比进行评定。
每周测定1次，相对于对照组，该比值在模型大鼠组明显下降，说明抑郁症组大鼠欣快感降低，这是抑郁症的核心表现之一。
4.2 旷场实验(OFT)
方法：将动物放入100cm×100cm×50cm、周壁和箱底为黑色的箱内，且其底面由25块相等的20cm×20cm正方形组成，视频跟踪分析软件(ANY-maze)系统自动划分。
将动物放入正中央格后开始测定，每次测定5min，测试过程采用摄像机记录，每只大鼠只进行一次行为测定，测定完毕，粪便清理干净后，用75％乙醇擦拭干净箱底，再进行下一只测定，采用单盲法。
测定指标为5min内不运动时间、攀爬次数(两只前爪离开底面)、水平运动距离(4只爪穿过格子数)。
4.3 强迫游泳实验
强迫游泳实验(forced swimming test, FST)是以之前Porsoltetal建立的实验方法为基础。在此实验中大鼠被放在开放的圆柱形白塑料容器内(直径40cm，高80cm)，往容器内注入40cm的水，温度为22～25℃，记录处于该环境的大鼠在产生绝望的不动状态过程中的一系列参数。
总记录时间为5min，采用单盲法。测定指标为不动时间(大鼠在水面漂浮只有轻微的活动，或是身体垂直于水面只有鼻子露出水面的时间)。相对于对照组，该值在模型大鼠组明显下降。
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