Southern杂交

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Southern杂交

▼服务简介

Southern杂交实验是分子生物学最经典的实验方法之一。

▼应用场景

Southern杂交实验可以确定出来是否有与探针同源的片段以及检测到的DNA样品中片段的长度。某些Southern杂交技术被广泛应用于遗传疾病的检测过程中、DNA指纹检测分析、以及PCR产物判断中。但该技术也具有其独特的实用性和普及性，无法通过其他方法进行代替，例如片段多态性检测（RFLP）。

▼实验原理

Southern杂交实验是对基因组DNA特定序列进行检测的常用方法，首先提取基因组并利用限制性内切酶消化DNA，在琼脂糖凝胶进行电泳分离，将DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性，综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果，便可绘制出DNA分子的限制图谱。