线粒体分离试剂盒

传统的分离线粒体的方法耗时费力， 并且需要进行Dounce匀浆，所以每次只能处理一种样品。ThermoScientific线粒体分离试剂盒使用的是基于试剂的非机械分离方法，不需要特殊仪器，因此可以同时处理多种样品（六种）。利用专利配方的试剂对培养的哺乳动物细胞沉淀进行温和的裂解可以得到最大量的线粒体，且将对线粒体完整性的伤害降至最小。该产品的说明书介绍了纯度/收率比的优化指南。该试剂盒也提供了配合使用杜恩斯匀浆的最优方法，使用该方法可以得到比单使用试剂的方法高两倍的线粒体回收率。两种方法通过差速离心分离线粒体和胞浆成分，使用台式微量离心机可以在大约40分钟以内完成实验（收获细胞之后）。分离的线粒体可以用于细胞凋亡、信号转导、代谢研究以及线粒体蛋白质组研究等后续实验。

产品特点:

线粒体完整性分析。分别使用基于试剂的方法(A和B)和Dounce匀浆法（C和D）从C6细胞中制备线粒体和胞浆组分。利用蛋白质免疫印迹分析各组份中细胞色素C (A和C)以及电压依赖性离子通道(VDAC) (B和D)。使用的底物为用于蛋白免疫印迹的SuperSignal皮克级化学发光底物(产品货号 34080)。M = 线粒体，C=胞浆

分析线粒体组份中的胞浆蛋白污染。从NIH 3T3细胞制备线粒体和胞浆蛋白组分。利用蛋白质免疫印迹分析各组份中的胞浆蛋白hsp90。M = 线粒体，C =胞浆。

降低线粒体组份中溶酶体和过氧化物酶体污染。利用基于试剂的改良分离方法制备了线粒体组份和胞浆组分。3,000 xg 离心收集较重的更纯的线粒体，12,000xg离心收集上清中的线粒体。利用蛋白质免疫印迹分析每个组份中A. 过氧化物酶体膜蛋白70 (PMP70, C6细胞)和B.溶酶体组织蛋白酶S (NIH3T3细胞)。M1 = 3,000 xg 线粒体组份，M2 = 12,000 xg 线粒体组份，C =胞浆。

参考文献：

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