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文献和实验
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提供商 :辉骏生物
服务名称 :MALDI-TOF/TOF 质谱鉴定技术服务
辉骏生物已成功为各地科研单位服务超过20000个以上的蛋白质质谱,包含数十个物种,数据发表在权威专业杂志Proteomics. 上。一、蛋白质谱实验技术概述-辉骏生物
质谱是将待测物质变为气态离子并将离子按质荷比(m/z)进行分离,检测各种离子谱峰的强度而实现分析的一种方法。蛋白质定性通常采用质谱分析结合数据库检索的方法,所分析的样本可以是蛋白质溶液、蛋白质胶条或胶点。
简单蛋白样本,例如双向电泳斑点或纯化蛋白,通常采用MALDI-TOF/TOF质谱(MS/MS)进行分析。
混合蛋白样本,例如蛋白溶液,或SDS-PAGE条带,通常采用液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术进行分析。应用领域有:亚细胞组分的全谱分析,IP、co-IP、Pull-down后的互作蛋白鉴定,或其他中等复杂蛋白样本的鉴定。
二、串联质谱技术原理-辉骏生物
串联质谱(MS/MS)检测蛋白的原理是:蛋白先经胰酶消化成肽段,肽段在质谱仪中离子化后,会带上一定量的电荷,通过检测器分析,可得到各肽段的质荷比(m/z),从而得知各肽段的相对分子质量。为获得肽段的序列信息,质谱仪会选取某些肽段进行破碎,再次分析,获得二级质谱。用检索软件选择相应的数据库对质谱数据进行分析,同时以打分的形式评判鉴定结果,当打分大于某个阈值时,即判定质谱鉴定成功,反之则鉴定失败。
LC-MS/MS方法是将蛋白酶切消化为肽段混合物,之后这些肽段先经高效液相色谱分离形成简单的组分,再进行串联质谱(MS/MS)分析;因此适合于混合蛋白样本的鉴定。
三、蛋白质质谱鉴定的技术优势-辉骏生物
1、高灵敏度:纳克级别鉴定能力;
2、高分辨率和精确度;
3、兼容性强、易操作。
4. 鉴定准确性、灵敏度高。
5. 采用高效液相色谱和质谱联用的分析方法,可以一次性鉴定成百上千种蛋白质。
四、蛋白质质谱鉴定服务内容-辉骏生物
1、蛋白质样品制备;
2、蛋白质酶切;
3、质谱鉴定和数据库检索;
4、实验报告提交。
五、送样须知,样品寄送需满足以下要求
1、样品来源:考染蛋白质全部接受,银染的蛋白质不得使用蛋白质干粉,蛋白质溶液等;
2、寄送要求:蛋白质条带和干粉冰袋包装寄送,蛋白质溶液干冰或液氮包装寄送,广州本地客户可上门收样。
注:样本应避免各类污染和反复冻融(特殊样本请联系客服人员)
六、质谱实验技术流程-辉骏生物
蛋白样本制备——蛋白酶解——串联质谱分析(或LC-MS/MS分析)——数据库检索——蛋白质鉴定结果
七、蛋白质质谱鉴定的实验报告内容-辉骏生物
一级质谱提供:质谱峰图;肽段分子量;数据库检索结果等。
二级质谱提供:质谱峰图;肽段分子量;数据库检索结果;肽段氨基酸序列等。
八、服务信息
项目名称 | 客户提供 | 结果交付 | 实验周期 |
MALDI-TOF/TOF | 1.双向电泳考染斑点(常温运输,广州地区可上门取样); 2. 样本信息(物种等); |
1. 质谱检索网页 2. 质谱图 3. 完整实验报告 |
2周 |
LC-MS/MS | 1. 蛋白溶液(干冰运输)或蛋白考染条带(常温运输); 2. 样本信息(物种、缓冲液成分等) |
1. 质谱检索网页和excel表 2. 部分肽段的质谱图 3. 完整实验报告 |
2周 |
九、蛋白质质谱鉴定的实验案例-辉骏生物
图1:蛋白质质谱鉴定结果。蛋白质经过酶切,一级质谱分析后选取强度较大的峰进行二级质谱分析。
十、服务周期及收费标准-辉骏生物
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电话:400-699-1663
邮箱: service@fitgene.com
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地址:广州市黄埔区科学城广州国际企业孵化器D506
※辉骏生物服务质量承诺:为客户提供客观的蛋白质质谱分析实验结果,鉴定不成功不收取任何费用。
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