植物核蛋白提取试剂盒(酶法，pull down适用)

库存 ：127

英文名 ：Plant nuclear protein extraction kit (enzyme method, Pull down)

保质期 ：一年

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

保存条件 ：蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃

规格 ：50T/100T

特别提示：包括植物核蛋白提取试剂盒(酶法，pull down适用)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：植物核蛋白提取试剂盒(酶法，pull down适用)
英文名称：Plant nuclear protein extraction kit (enzyme method, Pull down)
产品货号：HR8046
产品规格：50T/100T

植物核蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织，如叶片、根、种子等植物组织中提取核蛋白。提取过程简单方便。制备的核蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解植物核组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒采用优化的试剂配方组成，特别适用于下游进行蛋白质相互作用的研究实验，包括免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(co-IP)、Pμll-down等实验。
本试剂盒提取的蛋白也可以用于Western Blotting、蛋白质电泳、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒采用酶法提取，酶法提取制备的植物核蛋白，回收率提高，纯度高，保持天然活性，但是耗时较长。非酶法的提取试剂盒提取过程简单方便，速度快，可在1小时内完成，而且绝少交叉污染，但是回收率相比酶法较低。如果需要更加快捷的提取试剂盒，可以选择非酶法的提取试剂盒(相关产品HR0103)，对提取速度没有要求的话，可以选择酶法提取试剂盒。请根据实际需要选择试剂盒。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分，不可直接用于2D电泳，如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳，请使用我公司其他货号的试剂盒。也可以将zuì后样品除盐后再用于2D电泳，用脱盐柱脱盐处理(相关产品HR0389)。
我公司可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等不同样本的蛋白提取试剂盒，包含用于非双向电泳和双向电泳等不同下游应用的试剂盒以及含去垢剂成分和不含去垢剂成分的蛋白提取试剂盒，专用于蛋白质谱检测的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。我公司还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体等不同细胞器的提取试剂盒。

储存条件：蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。提取液A长期不用请置-20℃保存。
【注】：
●蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
●蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
有效期：一年。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要zuì新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

注意事项：
1．正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得zuì佳实验效果。
2．螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3．禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4．样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5．zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6．实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

产品特点：
1．使用方便。
2．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
4．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含5种独立的蛋白酶抑制剂Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
仪器：
●离心机● 振荡器● 涡旋混匀器● Dounce匀浆器● 移液器●冰箱●冰盒
试剂：
● PBS(pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液phosphate buffer saline/Dμlbecco’s
PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
耗材：
●离心管● 吸头

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

1．提取液制备：
每200μl提取液C中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
【注】：
● 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
● 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。
2．取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的200-500mg 植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎，加入1-2ml PBS 后用匀浆机充分匀浆或者加适量PBS 后用Dounce 匀浆器充分匀浆。
3．将匀浆液用100μm细胞筛过滤；
【注】：
● 没有细胞筛的话，在4℃，稍微静置，让粗纤维，成团组织块等沉降，或者以低于100g力条件下离心1分钟，收集细胞上清，弃组织沉淀。
●有些含黏液较多的样品可能难以吸取，可以将1ml 吸头尖稍微剪掉一点使用。
4．将滤液在2000g条件下离心5-10分钟，收集沉淀。
5.在沉淀中加入500μl提取液A，充分混匀。
【注】：
●培养细胞1000g条件下离心5分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞后用PBS洗涤2次，然后直接加入提取液A重悬。
● 大约每300μl细胞压积中加入1ml 提取液A。
● 一般加入样本体积的2-3倍体积的提取液A，充分淹没样本即可。
6．将细胞悬液置振荡器上37℃或室温振荡12-72小时。
【注】：
● 使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。
● 没有振荡条件也可以不振荡，中间每隔几小时用移液器吹打混匀即可。
● 根据下游蛋白的应用选择合适的温度，zuì佳温度为55℃。
● 不同类型的植物样本需要处理的时间差异较大。拟南芥较易处理，鲜嫩叶片较易处理，年龄小的样本处理时间短。拟南芥嫩叶zuì短4小时即可。
● 部分细胞壁较厚的植物类型可能需要处理更长时间。可以延长至72小时以上处理以提高核蛋白得率。
7.在2000g条件下离心10分钟，弃上清，收集沉淀。
8.在沉淀中加入提取液B，用Dounce 匀浆器充分匀浆，在匀浆液中补充提取液B 至1ml，充分混匀。
9．置振荡器振荡5-10分钟。
【注】：
● 使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。
● 没有振荡条件也可以不振荡，置4℃静置，稍微延长处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀即可。
10.在2000g条件下离心10分钟，弃上清，收集沉淀。
11.在沉淀中加入100-200μl冷的提取液C，高速涡旋振荡5秒。
12．置4℃振荡20-40分钟。
【注】：
● 使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。
● 没有振荡条件也可以不振荡，置4℃静置，稍微延长处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀即可。
13.在4℃，12000g条件下离心10分钟。
14．将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。
15．将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
【注】：
● 建议用BCA 法进行蛋白定量。相关产品：HR0329。
●蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。
常见问题分析：
●蛋白浓度低？
植物核蛋白丰度比较低，在条件允许的情况下，尽可能增加样本量。
处理部分样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当增加试剂A的匀浆次数，并适当延长试剂A和B的处理时间即可。zuì好在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
●用什么方法定量蛋白？
建议用BCA 法。不适合用Bradford 法，因为试剂A中含有干扰Bradford 法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用Bradford 法定量。
● 提取时出现胶状沉淀？
蛋白提取液处理产物中有时会出现少量透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。不检测和基因组DNA 结合特别紧密的特定蛋白的情况下，可以直接离心取上清进行后续实验即可；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理，300w/10秒间隔10秒，超声3分钟，随后离心取上清用于后续实验。检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，不必进行超声处理。
● 提取的蛋白具有活性吗？
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。

除了植物核蛋白提取试剂盒(酶法，pull down适用)，我公司还供应以下相关产品：



名称：一站式Tricine-SDS-PAGE套装
货号：BTN81205
规格：30次

名称：Tris-Tricine阴极缓冲液(1×)
货号：SNM377
规格：500ml

名称：AMCA标记抗兔免疫荧光染色试剂盒
货号：KFS039
规格：300T
适用于细胞或组织切片的免疫荧光染色。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时，就可以使用免疫荧光染色试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。含有AMCA标记的山羊抗兔IgG(H+L)抗体，可以用于检测兔来源的相应一抗，观察到的颜色为非常鲜艳的蓝色。

AMCA（Ex/Em：350nm/450nm）是一种常用的非常明亮的蓝色荧光探针。AMCA的荧光光谱与DAPI和Hoechst比较接近。

本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液，可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月，并且在6个月内至少可以重复使用10次。

本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。

本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片，至少可以检测300个样品。

注意事项：
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光，特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存，但存放时间通常不宜超过一周，随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
4. 如果观察时发现荧光过弱，可以适当提高一抗的浓度；如果荧光还是比较弱，可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
5. 需自行配制用于免疫荧光染色的相关试剂，需自备盖玻片和载玻片。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存：2-8℃，避光，有效期6个月。

名称：Flag-tag多肽
货号：SY0422
规格：4mg
Flag多肽（Flag-tag Peptide）是编码8个氨基酸的亲水性多肽（DYKDDDDK），含有肠激酶酶切位点，可用于免疫亲和层析。Flag多肽可在非变性条件下洗脱蛋白，有多种抗体可识别Flag多肽，如M1、M2和M5。

Cas No. （Cas No.）：98849-88-8
多肽序列（Amino acid sequence）：H-Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-OH
分子式：C41H60N10O20
分子量：1012.97
外观：白色粉末
纯度：> 98%
溶解性：溶于水或1%醋酸
储存条件：-20℃，有效期1年


名称：酵母蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用)
货号：HR8070
规格：50T/100T

名称：藻类蛋白提取试剂盒(2D电泳用)
货号：HR0181
规格：50T/100T
我司藻类蛋白提取试剂盒(双向电泳用)可以从各种藻类中提取总蛋白，包括蓝藻门的原核藻类和原生生物藻类。也可用于纯化蛋白的粗品制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。
提取的蛋白直接用于等点聚焦电泳、双向电泳。如需要用于SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、报告基因检测、酶活分析等下游实验的试剂盒，请联系我司，选用其它产品号的产品。

储存条件：蛋白酶抑制剂-20℃保存；蛋白提取液室温保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．使用方便，不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2．将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管 ● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

1．提取液制备：每 500μl的蛋白提取液中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物混匀后备用。
2．将藻类样品洗涤后离心。
3．每 100μl藻类沉淀样品中加入500μl的蛋白提取液，混匀后，置摇床振荡20-30分钟。
4.在 14000g条件下离心10分钟。
5．将上清吸入另一干净离心管，即可得到藻类总蛋白。
6．将上述蛋白提取物分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
注：
①细胞数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。