DAF-FM DA(NO 荧光探针 )100 次规格

DAF-FM DA(NO 荧光探针 )100 次规格

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品牌:上海邦景

货号: BJ-RD1077

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库存 :29

英文名 :DAF-FM DA(NO 荧光探针 )

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海邦景

保存条件 :低温冷藏

规格 :100 次

服务流程:
1DAF-FM DA(NO 荧光探针 )100 次规格客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4保存一周,-20保存一个月,-80保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
以下是DAF-FM DA(NO 荧光探针 )100 次规格的详细介绍点击了解更多蛋白质研究产品

储存事项:
A. DAF-FM DA(NO 荧光探针 )100 次规格RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase ADNase I后,按照每次使用量分装-20冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. DAF-FM DA(NO 荧光探针 )100 次规格组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20-80冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。

实验步骤:
(1) DAF-FM DA(NO 荧光探针 )100 次规格实验开始前将RNA提取液于65水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65水浴3-10 min,期间混匀2-3
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4离心20min
(8)弃上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9):(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)2V体积的无水乙醇,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)200ulDEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)

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