Calcein AM细胞增殖与毒性检测试剂盒

库存 ：285

保质期 ：一年

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

保存条件 ：-20℃

规格 ：500T/1000T

特别提示：包括Calcein AM细胞增殖与毒性检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Calcein AM细胞增殖与毒性检测试剂盒
产品货号：HR8300
产品规格：500T/1000T

绿色荧光细胞活性检测试剂盒是采用一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，检测细胞增殖情况。当荧光染色试剂其进入到细胞质后，酯酶会将其水解并留在细胞内,发出强绿色荧光，它的细胞毒性很低，不会抑制任何的细胞功能如增殖或淋巴球的趋化性。

储存条件：-20℃避光保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
● 使用方便：仅使用单一试剂；
●快速；
● 灵敏度高，数据可靠，重现性好，线性范围更宽；
● 结果稳定：试剂本身稳定性高，实验结果稳定可靠；
● 无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低；
● 适合于高通量药物筛选。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS ● 纯水 ● 移液器及吸头 ● 96孔培养板 ● CO2培养箱 ● 带有490nm波长的检测仪

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下来，导致每孔中的细胞数量不等，可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发，为了减少误差，建议培养板的四边每孔只加培养基，而不作为指标检测孔。
● 建议使用黑壁 96孔板。
● 不同细胞染色浓度和时间不同，建议做预实验摸索zuì佳染色浓度和时间，采用zuì低染色浓度。
细胞样本处理
1．收集细胞，加细胞悬液100μl(约5000-10000个细胞)到96孔板(边缘孔用无菌水或PBS 填充)。每板设对照(加100μl培养基)。
2．置37℃，5% CO2 孵育过夜，倒置显微镜下观察。
3．每孔加入10 μl 待检测药物溶液，37℃孵育。
4．到待测时间点进行细胞活性检测。
活性检测
1．从冰箱中取出荧光染色试剂，室温溶解后混匀。
2．加10μl荧光染色试剂到10ml PBS溶液中，涡旋混匀，配成染色工作液。
3．离心细胞，弃培养基，用PBS 洗涤细胞一次，离心，弃PBS。
4．每孔加入100μl染色工作液，37℃孵育30分钟或更长时间。
5．测定490 nm 各孔的吸光值，发射波长530nm。
细胞活力计算：
将各测试孔的OD 值减去调零孔OD 值或对照孔OD 值。各重复孔的OD值取平均数。
细胞活力% =(加药细胞OD-空白OD/对照细胞OD-空白OD)×100

除了Calcein AM细胞增殖与毒性检测试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：增强型CCK-8试剂盒
货号：YT128
规格：100次|500次|2500次|10000次
本试剂盒是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒，比普通的CCK-8试剂盒具有更好的检测灵敏度和更宽的线性范围。

WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan(参考图1)。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。



WST-8是MTT的一种升级替代产品，和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比线性范围更宽，灵敏度更高。

WST-8和WST-1相比，检测灵敏度更高，更易溶解，并且更加稳定。

本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。

本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有WST-8的增强型CCK-8溶液，无须再进行任何配制等操作。无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。

WST-8对细胞无明显毒性。加入增强型CCK-8溶液显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，便于找到zuì佳测定时间。

注意事项：
1. 由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发问题。一方面，由于96孔板周围一圈zuì容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加相同量的PBS、水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
2. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，所以还原剂(例如一些抗氧化剂)会干扰检测，如果待检测体系中存在较多的还原剂，需设法去除。
3. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。

储存条件：4℃避光，有效期一年。