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文献和实验
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库存 :42
英文名 :细胞松弛素 B 溶液 ,20mg/mL
CAS号 :详见说明书
保质期 :详见说明书
供应商 :上海邦景
保存条件 :低温冷藏
规格 :0.1mL
实验步骤:(1) 细胞松弛素 B 溶液 ,20mg/mL0.1mL说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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储存事项:
A. 细胞松弛素 B 溶液 ,20mg/mL0.1mL说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. 细胞松弛素 B 溶液 ,20mg/mL0.1mL说明书组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
磁珠法 mRNA 提取试剂盒25 次 柱式动物 RNAout50 次
Oligo(dT) 纤维素25mg 柱式动物 RNA-DNA 双提试剂盒50 次
Oligo(dT) 再生溶液100mL 柱式动物 DNAout50 次
链霉亲和素磁珠2mL 柱式凋亡 DNAout50 次
固相 RNase 清除剂100mL 柱式病毒 RNAout50 次
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 3.09 mL
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 3.01 mL
DAB 法生物素杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 2.0 9 mL
TMB 法生物素杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 2.0 1 mL
ECL 法生物素杂交检测试剂盒5次 环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次
骨骼肌细胞生长因子5mL Fluo-3AM( 钙离子荧光探针 )250μL
黑色素细胞生长因子5mL Fluo-3,五铵盐1mg
黑色素细胞生长因子 - 不含 TPA5mL Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL
滑膜细胞生长因子5mL ER-Tracker Red( 内质网红色荧光探针 )20μL
间充质干细胞成骨细胞分化生长因子5mL EHA105 农杆菌感受态细胞10×100μL
朝鲜芽孢八叠球菌 木素木霉
粪肠球菌ATCC29212冻干粉 细黄链霉菌
根霉属的种 凸形假单胞杆菌
异型酒香酵母 费氏志贺氏菌
热带假丝酵母 头状秃马勃
费氏志贺氏菌(福氏志贺氏菌) 产朊假丝酵母
皱褶假丝酵母 沙保罗琼脂平板70mm
斯氏油脂酵母 抗生链霉菌
黑化链霉菌 厌氧消化链球菌
希瓦氏菌 马其顿假丝酵母
细胞松弛素 B 溶液 ,20mg/mL0.1mL说明书黄色长孢链霉菌 假芝
奇异变形杆菌冻干粉 根霉属的种
单增李斯特菌 淡紫青霉
戊糖片球菌 伊氏李斯特氏菌
产氨短杆菌 球孢链霉菌
服务流程:
1)细胞松弛素 B 溶液 ,20mg/mL0.1mL说明书客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
上海邦景实业有限公司
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