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文献和实验
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库存 :37
英文名 :OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞
CAS号 :详见说明书
保质期 :详见说明书
供应商 :上海邦景
保存条件 :低温冷藏
规格 :0.1 mL×10
点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品:OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞0.1 mL×10规格详细介绍:
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞0.1 mL×10规格的相关产品:
MEQ,(6- 甲氧 -N- )100mg DiI( 细胞膜红色荧光探针 )10mg
Mito-Tracker Green( 线粒体绿色荧光探针 )50μL Dihydrorhodamine 123 10mg
MM1-43(FM®1-43)1mg Dihydroethidium( 超氧化物阴离子荧光探针 )5mg
MM4-64(FM®4-64)1mg DiBAC4(3)25mg
Monobromobimane [mBBR]25mg Di-8-ANEPPS5mg
一步法 96 孔板质粒 DNAout( 真空法 )1次 脱脂奶粉 ( 杂交专用 )50g
一步法单菌落质粒 DNAout50 次 脱氧胆酸5g
一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 离心法)1次 兔抗 His 标签多抗,HRP 标记100μL
一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 离心法)5次 兔抗 GST 标签多抗20μL
一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 真空法)1次 土壤腐殖酸清除剂100mL
土壤 DNAout30 次 小胶质细胞生长因子5mL
土壤 DNAout100 次 小 RNA 克隆试剂盒10 次
柱式土壤 DNAout50 次 硝酸纤维素膜,13×20cm1张
大提柱式土壤 DNAout4次 硝酸纤维素膜,13×20cm1张
柱式水样 DNAout50 次 消解酶 ( 溶细胞酶 ) 干粉100mg
鲍曼不动杆菌 藤黄微球菌
营养琼脂培养基90mm 淡紫青霉
紫红曲霉 金黄色葡萄球菌(敏感菌株)冻干粉
蜃楼耶尔森氏菌 不动杆菌
黄绿青霉 苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae
短乳杆菌 生孢梭菌冻干粉
肺形侧耳、柳树菌、树窝 枯草芽孢杆菌
大孢绿僵菌=金龟子绿僵菌大孢变种 植物乳杆菌(胚芽乳杆菌)
多头被孢 椭圆酿酒酵母
苏云金芽胞杆菌鲇泽变种Bacillusthuringienisvar.aisawai 金龟子绿僵菌
OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞0.1 mL×10规格黑根霉 裂皮侧耳
产气肠杆菌冻干粉 类球红细菌(球形红杆菌)
法氏柠檬酸杆菌 沙保罗葡萄糖琼脂表面培养基60mm/25cm2
耐硼赖酸芽孢杆菌 许旺酵母
猴头菌 成团肠杆菌
操作步骤:
1. OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞0.1 mL×10规格匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要
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