PCR 专用 LIC 克隆套装1μg说明书

库存 ：36

英文名 ：PCR 专用 LIC 克隆套装

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海邦景

保存条件 ：低温冷藏

规格 ：1μg

实验步骤：
(1) PCR 专用 LIC 克隆套装1μg说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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储存事项:
A. PCR 专用 LIC 克隆套装1μg说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. PCR 专用 LIC 克隆套装1μg说明书组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
Carboxy-PTIO( 清除剂 )50mg  CTP 溶液，100mM0.25mL
Ac-DEVD-CHO(Caspase3 抑制剂 )100μL  Congo Red 100mg
Catalase( 抗氧化酶 )200mg  ConA 糖蛋白分离试剂盒10 次
Catechin hydrate( 抗氧化剂 )0.5g  Cisplatin(DNA 交联剂 / 细胞凋亡诱导剂 )50mg
Cisplatin(DNA 交联剂 / 细胞凋亡诱导剂 )50mg  CHAPS5g
RNase 抑制剂 ( 人源 )400U  柱式 miRNA PAGE 胶回收试剂盒50 次
RNase 抑制剂 ( 人源 )2500U  柱式 G+细菌 RNAout50 次
RNase 抑制剂 ( 小鼠源 )3000U  柱式 DNA 清除剂50 次
RNase 抑制剂 ( 猪源 )500U  柱式 DNA 胶回收试剂盒50 次
非酶 DNA 清除剂1.5mL  柱式 DNA 胶回收试剂盒100 次
柱式动物线粒体 DNAout，测序级15 次  血液 RNAout 50 次
柱式植物 mtDNAout，测序级10 次  血液 DNAout50 次
柱式血液 mtDNAout，测序级10 次  血液 DNAout150 次
柱式昆虫 mtDNAout，测序级10 次  血清白蛋白清除剂15 次
丝状真菌线粒体 DNAout15 次  雪旺细胞生长因子5mL
阿拉伯糖醇汉逊酵母   生孢梭菌冻干粉
苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种Bacillusthuringiensissubsp.galleriae   调料葡萄球菌
白灵菇(白灵侧耳)   纺缍形赖酸芽孢杆菌
植物乳杆菌植物亚种   粗毛斗菇
甲型副伤寒沙门氏菌   链格孢
大肠杆菌   黄色短杆菌
苏云金芽胞杆菌以色列亚种 Bacillus thuringiensis subsp. israelensis   副溶血性弧菌
鲁氏毛霉   阿达青霉
侧耳   改良马丁琼脂培养基200ml
贝形侧耳、鹰翅菌   意大利青霉
PCR 专用 LIC 克隆套装1μg说明书改良马丁琼脂培养基70mm   头状丝孢酵母
桃色欧文氏菌   戊糖乳杆菌
叶柄粘球菌   紫红曲霉
李克犁头霉或伞枝梨头霉   安络小皮伞菌、鬼毛针、黑柄皮伞菌
泡盛曲霉   嗜盐四联球菌(酱油片球菌)
服务流程：
1）PCR 专用 LIC 克隆套装1μg说明书客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日