即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)20 次说明书

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英文名 ：即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海邦景

保存条件 ：低温冷藏

规格 ：20 次

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即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)20 次说明书详细介绍：

公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)20 次说明书的相关产品：
AP 标记的抗生物素抗体10μL  环氧基磁珠2mL
HRP 标记的抗生物素抗体10μL  环孢霉素 A 溶液 ,10mg/mL1mL
显影定影套装1套  滑膜细胞生长因子5mL
显影粉1袋  红细胞裂解液 B 型 ( 流式细胞分析用 ) 100mL
定影粉1袋  红细胞裂解液 A 型 ( 核酸纯化 ) 100mL
凝胶法 miRNA 分离试剂盒 50 次  柱式腐殖酸清除剂30 次
一站式大提柱式 miRNAout5次  柱式腐殖酸清除剂100 次
一站式动物 mRNAout25 次  柱式粪便 RNAout50 次
一站式全血 mRNAout25 次  柱式粪便 DNAout50 次
一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒50 次  柱式分枝杆菌 RNAout50 次
柱式尿液 DNAout50 次  一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒30 次
柱式鼠尾 DNAout50 次  一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒100 次
柱式海洋动物 DNAout50 次  一步式 RT-PCR Mix 1mL
植物 DNAout50 次  一步式 PAGE 染液10 次
柱式植物 DNAout50 次  一步离心式石蜡清除剂100 次
pH7.0-蛋白胨缓冲液200ml   停乳链球菌
登佐链霉菌   日本根霉
化脓性链球菌   少根根霉
异常汉逊酵母   干燥棒杆菌
近平滑假丝酵母   玫瑰褐链霉菌
大肠埃希菌冻干粉   干酪乳杆菌
缺陷短波单胞菌   干酪乳杆菌  模式菌株
凝结芽孢杆菌   耐盐芽孢杆菌  产β-半乳糖苷酶和木聚糖酶
贝形侧耳、鹰翅菌   大肠埃希菌CMCC44102冻干粉
黄绿绿僵菌   米氏硫胺素芽孢杆菌
即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)20 次说明书副溶血性弧菌   生香毛霉
人苍白杆菌   青枯假单胞菌
紫色链霉菌   苏云金芽孢杆菌猝倒亚种
荧光威克酵母   酵米面假单胞菌(酵米面黄杆菌)
球孢链霉菌   无乳链球菌
操作步骤:
1. 即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)20 次说明书匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要