无血清细胞冻存液（冻存步骤）

1、常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。

2、根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。

3、将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中，1000rmp，5 分钟离心收集培养细胞沉淀，彻底弃去离心管中的上清液。

4、加入适量的HATAKA无血清细胞冻存液细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度约为 5×10⁵-1×10⁷/ml。轻柔地混匀细胞，制成细胞混合液。

5、将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中，建议每管 1ml 或 1.5ml。

6、直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中，可长期冷冻保存。

7、如果想液氮中长期保存，需先放入-80℃冰箱至少一天时间，方可移至液氮罐中保存。




无血清细胞冻存液（复苏步骤）
1、从冰箱中取出冻存的细胞，立即放入 37℃水浴槽中快速解冻。
2、待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即加入 1ml 细胞培养基于冷冻管中与细胞混合，加入适量的新鲜细胞培养基，使用移液管缓缓加入到细胞沉淀，轻柔地混匀，将细胞混合液移至事先准备好的培养容器中。
3、镜检细胞后，可根据各自研究的需要和方法经行细胞常规培养。


实验对比图：


 无血清细胞冻存液 质量保障
    HAKATA无血清细胞冻存液细胞冻存液经过严格的内毒素、渗透压、病原体和 pH 检验，确保产品不含病菌、病毒以及支原体等。用于常规的细胞冻存，-80℃可长期保存（>5 年），细胞存活率在90-98%。

注意事项
HAKATA无血清细胞冻存液在冻存细胞分装后，应减少在外存放时间，尽快移入到-80 ℃超低温冰箱。
对于干细胞（ES 细胞）等冻存时，我们建议用户在使用前，事先对所冻存的胞进行至少为期1周的该产品试验性细胞冷冻保存培养，确认性能后再进行正式冻存。
本品含有 10%DMSO，部分对 DMSO 敏感的细胞，建议对其进行至少1周的本产品试验性的细胞冻存培养，确认性能后再正式冻存。