快速核酸银染试剂盒

快速核酸银染试剂盒

价格: ¥380 - 3800

品牌:百奥莱博

货号:SY0274-CHM

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库存 :106

英文名 :Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid

保质期 :长期

供应商 :北京百奥莱博科技有限公司

规格 :1000ml

特别提示:包括快速核酸银染试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:快速核酸银染试剂盒
英文名称:Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid
产品货号:SY0274
产品规格:1000ml

分子生物学实验中,常利用银染的方法显示聚丙*酰胺凝胶或者琼脂糖凝胶中的核酸条带,其检测原理是:银离子(Ag+)可与核酸形成稳定的复合物,随后Ag+ 在碱性环境下被还原剂如jiǎ醛还原成银颗粒,后者通过显色可把核酸电泳条带染成黑褐色。该方法检测灵敏度比EB高达200倍,常用于检测SSR标记、SNP标记等。

常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等若干个步骤组成,操作十分繁琐,尤其不适用于大批量实验。而本品的推出可大大改善上述问题,主要体现在:1)超快速,整个过程仅需20分钟;2)操作简单,只有染色和显影两步;3)灵敏度跟常规方法相当,比EB高200倍,能检测到10ng的DNA条带。4)两个成分都是现用现配,可重复性好。

按照本方案提供的配制方法,共可配制试剂A和试剂B分别1000ml。

产品组份:
组分名称 规格 外观
试剂A 1 2g 干粉
试剂A 2(10×) 100ml 液体
试剂A 3(10×) 100ml 液体
试剂B 1(10×) 100ml 液体
试剂B2 5ml 液体


注意事项:
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)银染主要出现在PAGE胶的表面,因此该方法更适合用于薄胶(0.5-0.75mm)的检测。
3)染色过程中,缓慢的振荡是必要的,一般选择40-60 rpm。
4)凝胶表面的裂纹多是由于压力、手印及表面干燥所致,所以全程操作中都应带手套。
5)PAGE凝胶背景呈均一的黑色多是水中的杂质引起的,所以溶液的配制应使用电导率小于1 μS的去离子水。
6) 如果染色后有呈灰尘或烟雾状灰色或棕色的沉淀出现在凝胶表面,可能是几步漂洗过程不够彻底,或染色过程温度太低。
7)较深的银染背景多是丙*酰胺中的杂质所致。
8)室温操作时,温度的波动往往会干扰银染的效果,恒温水浴可以解决这个问题。
9)染色使用的玻璃器皿必须非常干净,用酸浸泡可以满足要求。
10)银染应尽快照相,随着时间延长,蛋白条带会变浅,而背景会加深。
11)影响硝酸*染色效果的因素很多,其使用容器的材质也是一个非常重要的因素。通常玻璃平皿是zuì理想的银染容器,其化学性质极其稳定,几乎不与银染试剂中的任何成分发生反应,且不具有吸附染料的特性。其次是医用搪瓷盘,瓷釉为无机玻璃质材料,能耐各种浓度的无机酸(包括强氧化性酸)、有机酸、弱碱和强有机溶剂,但不耐酸、碱介质交替使用,而常规银染法就是酸碱介质交替使用,因此搪瓷盘银染效果不如玻璃平皿。塑料种类较多,如果塑料是由含氨基官能团的有机物(脲、三聚*胺或苯代三聚*胺)与醛类(主要是jiǎ醛)化合物经缩聚反应而得,则这种塑料会在碱性溶液中与有强还原作用的jiǎ醛发生反应,进而使jiǎ醛消耗,减弱银离子与蛋白的结合,降低显色敏感度和显色速度。

操作方法

1 配制试剂A(以100ml为例)
所需要配制的试剂A(即染色液)的体积跟PAGE胶的大小相关,一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。本方案以配制100mL试剂A为例进行详述,请根据具体凝胶大小,确定实际所需染色液用量,再按比例改变各组分用量。
以100ml试剂A为例,在一干净烧杯中加入下列组分搅拌混匀即可。试剂A需要新鲜配制。
去离子水:80 mL
试剂A1:0.2 g
试剂A2:10 mL
试剂A3:10 mL

2 配制试剂B(以100ml为例)
所需要配制的试剂B(即显色液)的体积跟PAGE胶的大小相关,一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。本方案以配制100ml试剂B为例进行详述,请根据具体凝胶大小,确定实际所需试剂B用量,再按比例改变各组分用量。
以100ml 为例,在一干净烧杯中加入下列组分搅拌混匀即可。试剂B需要新鲜配制。
去离子水:89.5 mL
试剂B1:10 mL
试剂B2:0.5 mL

3 染色
1)PAGE电泳结束后,将PAGE胶转移到装有去离子水的瓷盘中,进行漂洗,2min/次,共2次。
2)将PAGE胶转移到适当体积的试剂A,使试剂A在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温染色10min。
3)倒掉试剂A,用去离子水快速漂洗2次,每次30秒。
4)将PAGE胶转移到适当体积的试剂B,使试剂B在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃直到颜色显现,一般需要10min左右。
5)将PAGE胶置于适当背景下照相。

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