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文献和实验
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库存 :43
英文名 :分子杂交炉
CAS号 :详见说明书
保质期 :详见说明书
供应商 :上海邦景
保存条件 :低温冷藏
规格 :1台
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
点击了解更多探针标记及检测产品:
分子杂交炉1台规格详细介绍:
操作步骤:
1. 分子杂交炉1台规格匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
以下是分子杂交炉1台规格的相关产品:
克拉霉素81103-11-9质量规格:>97%,USP34,BR
克拉霉素(标准品)81103-11-9质量规格:HPLC>95%,标准品
克林霉素磷酸酯24729-96-2质量规格:克林霉素含量>758μg/mg,USP32
克林霉素磷酸酯(标准品)24729-96-2质量规格:用于含量测定
克罗拉滨/氯法拉滨123318-82-1质量规格:> 99%,BR,可用于细胞培养
正十五烷(标准品)N-PENTADECANE质量规格:内标
咖啡酸乙酯(标准品)ETHYL CAFFEATE质量规格:含量测定
柠檬酸无水Citric acid质量规格:>99%,AR
柠檬酸无水(标准品)Citric acid质量规格:含量测定
硫酸钾(标准品)Potassium sulfate 质量规格:含量测定
优级真空泵油(Viscosity Grade 100)质量规格:Viscosity Grade 100Vacuum pump oil
优级真空泵油(Viscosity Grade 150)质量规格:Viscosity Grade 150Vacuum pump oil
紫尿酸 一水合物(97%)质量规格:0.97Violuric acid monohydrate
生育酚乙酸酯(标准品)质量规格:分析标准品Vitamin E acetate
烯效唑(分析标准品97.5%)质量规格:分析标准品97.5%Uniconazole
白色念珠菌冻干粉 土壤伯克氏菌
痤疮杆菌 斯氏梭菌
嗜酸乳杆菌 圆酵毛壳
假结核耶尔森氏菌 变形杆菌
紫晶口磨 海洋海栖菌 模式菌株
粗糙链孢霉 枯草芽孢杆菌深黑变种
解肝磷脂土地杆菌 亚麻刺盘孢
白黄链霉菌 营养肉汤培养基7ml
尘埃芽孢杆菌 黑曲霉
胰蛋白胨大豆琼脂表面培养基60mm/25cm2 苏云金芽胞杆菌鲇泽变种 Bacillus thuringienis var. aisawai
分子杂交炉1台规格多型孢毛霉 宋氏志贺氏菌
苏云金芽胞杆菌山东亚种Bacillusthuringiensissubsp.shandongiensis 福氏志贺氏菌
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂90mm 10 个/包 干酪棒杆菌(乳酪棒杆菌)
蜜环菌 生孢梭菌(产芽孢梭状芽孢杆菌)
马红球菌 拟热带假丝酵母
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