大肠杆菌XL10-Gold感受态细胞价格_品牌:xuanya-丁香通官网

保存条件：-20℃

保质期：两年

英文名：E.coli XL10-Gold Chemical Competent Cell

库存：900

供应商：上海烜雅生物科技有限公司

大肠杆菌XL10-Gold感受态细胞产品及特点：
本产品是采用大肠杆菌 XL10 菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于 DNA 的化学转化。本产品适用于高效的 DNA 克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定复制，还适合非甲基化 DNA 的转化。使用 pUC19 质粒检测，本产品转化效率可达 108。本感受态细胞具有四环素和氯霉素抗性。
菌株基因型为：Tetr D(mcrA)183 D(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F- proAB lacIqZDM15 Tn10(Tetr ) Amy Camr ]

大肠杆菌XL10-Gold感受态细胞运输及保存：
干冰运输、-80℃保存，有效期半年。
自备试剂：目的 DNA、SOC 或 LB 培养基等

大肠杆菌XL10-Gold感受态细胞使用方法
1. 取感受态细胞置于冰浴中（或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中）。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以 50 μL 感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的 DNA（根据实际情况加入适量的 DNA，质粒或连接产物），用手拨打 EP 管底或用移液器轻轻吹打混匀，冰上静置 25 分钟。
3. 42℃水浴热击 45 秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置 2-3 分钟，晃动会降低转化效率。
4. 每个离心管中加入 450 μL 无菌的 SOC 或 LB 培养基（不含抗生素）。
5. 30℃，225 rpm 复苏 90 分钟。（当质粒中含有不稳定片段时， 30℃培养可降低错误重组的概率，若转化 control PUC19 计算转化效率，则需 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。）
6. 5000 rpm 离心 1 分钟收菌，留取 100 μL 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 SOC 或 LB 培养基上。
7. 平板倒置放于 30℃培养箱过夜培养。（若转化 control PUC19 计算转化效率，则需 37℃培养过夜）

大肠杆菌XL10-Gold感受态细胞注意：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的 DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的 DNA 总量较少，可取 200-300 μL 转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心（5,000 rpm，1 分钟）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于 30℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于 4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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