大肠杆菌SURE化学感受态细胞价格_品牌:xuanya-丁香通官网

保存条件：-20℃

保质期：两年

英文名：E.coli SURE chemical Competent Cell

库存：900

供应商：上海烜雅生物科技有限公司

大肠杆菌SURE化学感受态细胞产品及特点：
本产品是采用大肠杆菌 SURE 菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于 DNA 的化学转化。该菌株主要是用来克隆不稳定 DNA 结构如重复序列、二级结构（如 Z-DNA）等。菌株基因型：

大肠杆菌SURE化学感受态细胞运输及保存：
干冰运输、-80℃保存，有效期半年。
自备试剂：目的 DNA、SOC 或 LB 培养基等

大肠杆菌SURE化学感受态细胞使用方法
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以 50 μl 感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的 DNA（根据实际情况加入适量的 DNA，通常 100 μl 感受态细胞能够被 1 ng 超螺旋质粒 DNA 所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴 30 分钟。
3. 42℃热击 45 秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置 2-3 分钟。
4. 每个离心管中加入 450 μl 无菌的 SOC 或 LB 培养基（不含抗生素），混匀后置于 37℃摇床，150 rpm 振荡培养 45 分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的 SOC 或 LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于 37℃ 直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养 12-16 小时。

大肠杆菌SURE化学感受态细胞注意：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的 DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的 DNA 总量较少，可取 200-300 μl 转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心（4,000 rpm，2 分钟）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于 37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于 4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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