DNA去磷酸化试剂盒价格_品牌:xuanya-丁香通官网

保存条件：-20℃

保质期：两年

英文名：DNA Dephosphorylating Kit

库存：900

供应商：上海烜雅生物科技有限公司

DNA去磷酸化试剂盒产品及特点：
分子克隆时，载体的自连极大降低了连接效率，而对载体 DNA 两个 5′端的 -PO4 基团进行去磷酸化处理可以抑制自连反应。此外在进行 DNA 5′端标记前，也需要将其本来的-PO4 基团去除再加上标记基团。本公司开发的 DNA 去磷酸化产品就是针对这一目的而开发。它具有下列特点：
1. 把 DNA 5′端的-PO4 基团变成-OH 基团，丧失连接能力。
2. 模板可以是单链 DNA，也可以是双链 DNA，既可以是平末端，也可以是 5′ 端突出或 3′端突出的粘性末端。
3. 处理后的核酸纯化后可以直接用于连接反应和标记反应。
4. 本产品足够 20 次去磷酸化实验。

DNA去磷酸化试剂盒运输及保存：
低温运输，-20℃保存，有效期为 6 个月。
自备试剂：核酸片段

DNA去磷酸化试剂盒使用方法
注意：dNTP 和 ATP 也是碱性磷酸酶的底物，所以如果 DNA 溶液中有 dNTP 和 ATP，一定要先将其去除。否则它们会耗掉大量的碱性磷酸酶，降低 DNA 去磷酸化效率。
1、在微量离心管中配制下列反应液（50μL）：

2、建议在 37℃反应 60 分钟（对平末端、5′端突出或 3′端突出的 DNA 片段均采用此保温条件）。
3、65℃反应 15 分钟变性碱性磷酸酶。
4、酚氯仿抽提去除酶活性，乙醇沉淀 DNA 待用（本试剂盒不提供相关试剂）。

DNA去磷酸化试剂盒附：酚/氯仿抽提 DNA、乙醇沉淀浓缩 DNA(本试剂盒不提供相关试剂，需要从本公司另购相关试剂，下列操作仅供参考)：
1、在 50 uL DNA 溶液中加入 50 uL 超纯水增加体积，以免纯化过程中 DNA 丢失。如果有必须，可以加入和 4uL 核酸助沉剂提高回收效率。
2、加入 100uL 酚/氯仿/ 25：24：1 混合液震荡半分钟混匀，室温 12000g 离心 3 分钟，转移上清到新离心管中。
3、加 0.1 倍体积（即 10uL）的 3 M 乙酸钠溶液（pH 5.2）。
4、再加入 2.5 倍体积（即 250uL）的无水乙醇。
5、混匀后 12000g 4℃离心 10 分钟，小心弃上清。
6、加入 1mL 70%乙醇，短暂离心 3 分钟后小心弃上清。
7、短暂离心 5 秒，吸弃残留液体（约 30-50uL）。
8、室温放置 2 分钟干燥后加入适量的超纯水溶解 DNA，立即使用或放-20℃长期保存。

DNA去磷酸化试剂盒相关产品：

填入法 DNA 末端标记试剂盒 C

DNA 5’末端标记试剂盒

dNTP 溶液 ( 标记专用 )

生物素标记 dUTP 溶液

标记 dUTP 溶液

Aminoally-dUTP 溶液，10mM

Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM

Cy3-dCTP 溶液，10mM

Cy5-dCTP 溶液，10mM

柱式探针纯化试剂盒

Sephadex G50 介质

DNA去磷酸化试剂盒转膜