产品详情
文献和实验
相关推荐
保存条件 :-20℃
保质期 :两年
英文名 :Ribo-SPIA RNA Amplification Kit
库存 :900
供应商 :上海烜雅生物科技有限公司
其他扩增试剂盒产品及特点:血液样品和各种临床样品(包括组织检查、FFPE 切片或少量细胞样品)都是基因表达分析和诊断的常见材料,但这些样品通常数量有限,质量不高,并且还没法进行第二次取样。所以得到足够 RNA 量供后续试验是一个非常棘手的瓶颈。为解 决这一问题,本公司根据 Ribo-SPIA 技术,开发了本产品。Ribo-SPIA 技术的核心 是利用 DNA/RNA 嵌合引物,以带 polyA 尾巴的 mRNA 为模板进行逆转录并得到 双链 cDNA、RNase H 不间断地在 cDNA 第 1 链中的 RNA 部分产生裂口,DNA 聚合酶以此裂口为基础进行链取代聚合反应,产生 cDNA 单链。此技术原理图如下:
其他扩增试剂盒本产品具有下列特点:
1. 高效,能线性扩增 1000-10000 倍,能用 5-100 ng 总 RNA 模板扩增得到 5 ug 左右的单链 cDNA(扩增的 cDNA 主要来源于总 RNA 中的 mRNA)。
2. 步骤简单方便,扩增在恒温进行,只需要 4 个小时,不需要特殊仪器设备。
3. 保真性好,保持 RNA 样品中各分子的相对丰度。
4. 尤其适用于 RNA 产量和质量都不高的样品。
5. 扩增得到的单链 cDNA 能直接用于各种后续试验,包括 qPCR、芯片分析、杂 交反应等。
6. 本产品足够做 10 次双链 cDNA 的合成,20 次 SPIA 扩增。
其他扩增试剂盒运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期为 1 年。
使用方法
一:样品 RNA 的制备 本产品不含 RNA 相关试剂,用于 Ribo-SPIA 扩增的每个批次的 RNA 样品最好 先做一个预实验。总 RNA 样品的浓度必须在 1-20ng/uL,一次 RIBO-SPIA 所需 总 RNA 的量为 1ug。也可以使用 mRNA,一次 Ribo-SPIA 所需总 mRNA 的量为 5-100 ng。过低则需要浓缩,过高则需要用无 RNase 的水稀释。RNA 必须经过 DNase 处理,不能含 DNA 污染。微量提取时不能使用核酸类的助沉剂。
注意:本 产品只能扩增含带 polyA 尾巴的 RNA,不能扩增 DNA 和不含 polyA 尾巴的 RNA。
其他扩增试剂盒二:一管式双链 cDNA 的合成
1. 在 0.5mL PCR 管中,按下表配制双链 cDNA 合成反应。
注意:最好每次实验 设置一个阴性对照组,在此对照中用超纯水替代自备的 mRNA 或总 RNA:
三:SPIA 扩增 2. 在 0.5mL PCR 管中,按下表配制 20uL 的 SPIA 反应体系。
注意:最好设置 两个阴性对照组,在此两个对照中分别用超纯水替代 SPIA 引物和 cDNA 双链 反应液。
其他扩增试剂盒四:SPIA 扩增产物的检测
3. 取 5uL SPIA 扩增产物进行 PAGE 电泳检测。标准的反应结果是产生长度在 200-2000bp 之间的产物。
4. 如果产物将用于 PCR 定量,则可以不经过纯化直接使用,如果需要用于芯片杂 交和浓度测定,则需要按常规的方法纯化 cDNA 以便去除残留的 dNTP 和引物。
5. OD 检测纯度和浓度。在 OD260 的波长下测样品你给的光吸收。由于扩增产 物是单链 DNA,故 1OD260=33ug/mL。
6. 所得 DNA 可以放-20℃长期放置。
其他扩增试剂盒相关产品:
凝固血液 DNAout |
凝固血液 DNAout |
柱式凝固血液 DNAout |
FTA 血片 DNAout |
柱式冻存血液 DNAout |
柱式冻存血液 DNAout |
血液线粒体和核 DNA 双提试剂盒 |
柱式毛发 DNAout |
痰液 DNAout |
痰液采集器 |
柱式骨骼 DNAout |
其他扩增试剂盒柱式拭子 DNAout |
一管式拭子 DNAout |
一管式拭子 DNAout |
石蜡包埋组织 DNAout |
柱式石蜡包埋组织 DNAout |
柱式石蜡包埋组织 DNAout2.0(二代测序专用) |
粪便 DNAout |
粪便 DNAout |
柱式粪便 DNAout |
凋亡 DNAout |
柱式凋亡 DNAout |
柱式尿液 DNAout |
柱式鼠尾 DNAout |
柱式海洋动物 DNAout |
植物DNA提取 |
植物 DNAout |
柱式植物 DNAout |
磁珠植物 DNAout |
大提柱式植物 DNAout |
百万碱基级植物 DNAout |
Southern 级植物 DNAout |
一管式植物 DNAout |
一管式植物 DNAout |
中草药 DNAout |
其他扩增试剂盒中草药 DNAout |
柱式植物油 DNAout |
木材 DNAout |
柱式酱油 DNAout |
真菌DNA提取 |
上海烜雅生物科技有限公司
实名认证
钻石会员
入驻年限:7年