产品详情
文献和实验
相关推荐
库存 :174
保质期 :长期
供应商 :北京百奥莱博科技有限公司
规格 :20T|50T
特别提示:包括细胞周期检测试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:细胞周期检测试剂盒
产品货号:KFS314
产品规格:20T|50T
本试剂盒可应用于培养细胞(悬浮、贴壁)的DNA 含量(细胞周期)检测。细胞周期(cell cycle)是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。在这个过程中,细胞遗传物质复制并加倍,且在分裂结束时平均分配到两个子细胞中去。细胞周期又可以分为间期(interphase)和有丝分裂期(M phase),细胞间期又常划分为休眠期(G0),DNA 合成前期(G1),DNA 合成期(S),DNA 合成后期(G2),整个周期可表示为G1→S→G2→M。DNA 周期检测可用来反应细胞周期的各个期的状况,即细胞增殖状况。利用细胞内DNA 能够和荧光染料(如碘化丙啶PI)结合的特性,细胞各个时期其DNA 含量不同从而结合的荧光染料不同,流式细胞仪检测的荧光强度也不一样。
细胞发生凋亡时,由于胞浆和染色质浓缩、核裂解,产生凋亡小体,使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期,细胞对前向角光散射的能力显著降低,对900 角光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期,前向角和900 角光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察凋亡细胞。用PI 对细胞进行染色,凋亡细胞由于总DNA 量降低,于正常G0/G1 细胞群前出现DNA 低染细胞群,即G1 峰前出现亚二倍体峰(sub-G1),细胞凋亡群。
除了细胞周期检测试剂盒,,我公司还供应以下相关产品:
名称:TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)
货号:YT137
规格:20次|50次
本试剂盒提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品,经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。本试剂盒足够检测20个样品。
试剂盒组分:
TdT酶———————————40μl
Biotin-dUTP————————960μl
TdT酶稀释液(选用)—————500μl
Streptavidin-HRP——————22μl
Streptavidin-HRP稀释液———1ml
DAB显色液A————————6ml
DAB显色液B————————6ml
标记反应终止液——————6ml
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3"-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP),随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合,zuì后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞,这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
本试剂盒有如下优点:
(1)高灵敏度:背景染色极低,阳性染色强,可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有 DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。
(2)特异性好:TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。
(3)快速:仅需约2-3个小时即可完成。
(4)应用范围广:可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,zuì好同时检测多个凋亡指标。
注意事项:
1. 需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS,用于封片的抗荧光淬灭封片液(YT097)等适当的封片液,用于固定的4%多聚jiǎ醛或向百奥莱博订购免疫染色固定液(YT086),同时需自备含0.1% Triton X-100的PBS或向百奥莱博订购免疫染色洗涤液(YT089)。 需自备过氧化氢,除石蜡切片外需自备甲*。
2. 如果用于石蜡切片的检测,需自备蛋白酶K,二甲*。
储存条件:-20℃。
北京百奥莱博科技有限公司
实名认证
钻石会员
入驻年限:9年