产品详情
文献和实验
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保存条件 :常温运输和保存
保质期 :两年
英文名 :Column Plant DNAout
库存 :860
供应商 :上海烜雅生物科技有限公司
大提柱式植物DNAout产品及特点:本产品是在xuanya植物DNAout基础上开发的柱式植物基因组DNA提取产品,可以用于多种植物基因组DNA(含叶绿体和线粒体DNA)的快速提取。
1.纯度高,不含污染和抑制剂,可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、SouthernBlotting,microsatelliteanalysis等各种后续分子生物学实验。
2.产率一般在3-30ug/100mg样品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段长度一般在40-50Kb左右。
3.适用范围广,可以使用于绝大多数植物的各种组织。
4.不会发生离心柱堵塞现象。
大提柱式植物DNAout运输及保存:
常温运输和保存,有效期一年
自备试剂:氯仿
大提柱式植物DNAout使用方法
注意:溶液A和溶液B容易产生沉淀,溶液B比较粘稠,用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分摇匀。
1.65℃预热柱式植物DNAout溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取0.75mL加入到10mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2.称取植物组织0.1-0.5g左右,剪成微小的碎片,加入到有溶液A的10mL塑料离心管中并短暂匀浆。也可以液氮研磨后将粉末加入到管中(建议不要在陶器或玻璃研钵中破碎细胞,因为二氧化硅会非特异地吸附DNA,降低DNA回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。
3.将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的1.5mL塑料离心管(此时匀浆液较为粘稠,可将枪头剪去一截后转移上清,不能吸取的植物碎片可以小心倒入)。
4.在匀浆液中加入0.5倍体积预热的溶液B到离心管中,颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。(由于溶液B比较粘稠,可以将1mL枪头剪去一截再吸取)。
5.65℃水浴3-5分钟。如果室温放置,DNA产量会降低10-20%。
6.加入200uL自备氯仿,震荡混匀10-30秒,此时溶液将呈乳白色。
7.12,000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明,中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中,避免触及中间层的白膜。
8.加入1.5倍体积的溶液C,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。
9.12,000rpm室温离心1分钟,DNA将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
10.将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中,12,000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。
11.重复上步操作一次。
12.空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
13.将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中,加50-100uLDNA洗脱液2.0,室温放置3-5分钟。
14.12,000rpm室温离心1分钟即得植物DNA溶液。
15.由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强,可以重复上步操作一次,以洗脱得到更多的DNA。
16.直接取5-10uL电泳检测DNA,其余放冰箱备用。
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