粪便DNAout

粪便DNAout

价格: ¥100 - 2000

品牌:xuanya

货号:XY-TE-0256

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产品详情

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保存条件 :常温运输和保存

保质期 :两年

英文名 :Column Stool DNAout

库存 :860

供应商 :上海烜雅生物科技有限公司

粪便DNAout产品及特点:
本产品是动物粪便DNAout的柱式升级产品,专门用于从各种动物粪便中快速提取高质量的DNA。
跟动物粪便DNAout,它具有下列特点:
1.操作更加简单快速,一个样品只需要十多分钟的时间。
2.DNA更加纯净,OD260/280一般都在1.8以上,得到的DNA样品原液或稀释液可以直接用于PCR扩增。
3.每次微量提取可以处理100-300mg左右的样品,能得到5ug左右DNA,片段长度在30Kb左右。
4.可以同时提取到肠道上皮细胞和可能的肠道病原菌的DNA。
5.试剂无毒无害,环保。

粪便DNAout运输及保存:
常温运输及保存,有效期一年。
自备试剂:氯仿。

粪便DNAout使用方法
1.65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后充分混匀,取0.5mL加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2.称取0.1-0.3g的粪便,加入到含预热溶液A的离心管中,震荡器上剧烈震荡5-10分钟。如果是扩量操作,可以使用更多粪便和较大离心管。也可以将同一种粪便在较大离心管中震荡处理,然后再分到1.5mL离心管中。注意:不论使用大的还是小的离心管,一定要让管底的粪便震荡起来。
3.将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
4.12000-15000g室温离心3分钟,将上清转移到一新离心管中(上清液一般呈淡黄色或深棕色,实际颜色随样品而异,上清液的体积一般为300-400µL)。
5.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀,溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
6.将离心管冰浴至少5分钟。
7.12000-15000g室温离心3分钟,转移上清到新的1.5mL离心管中,上清液颜色将比第4步得到的上清的颜色稍淡,体积在0.7mL左右。
注意:下面第8-第9步的氯仿抽提操作可以省略,直接进入第10步,但DNA的产量会低50%左右,OD260/280在1.7-1.8。如果直接进入第10步,则转移的溶液体积不要超过0.6mL,否则没有空间加溶液C。
8.加入0.2mL的氯仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
9.12000-15000g室温离心3分钟,小心转移上清到新离心管中。说明:离心后两相交界面将有白色膜状物,其中有机相部分颜色较深,一般呈淡棕色。将0.5mL上清转移到新的1.5mL离心管中。如果有多余的可以弃之不用。
10.加入0.8mL的溶液C,上下颠倒30秒混匀。
11.分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,12000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,12000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液)。
12.加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
13.如果有必要,可以再加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液。增加一步洗涤能使最后得到的DNA的纯度稍有提高,但产量稍微有所降低。
14.12000-15000g室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
15.将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中,加入50-100uLDNA洗脱液2.0。
16.室温放置离心吸附柱1-2分钟。
17.12000-15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为DNA样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。

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