SILAC 细胞培养条件下稳定同位素标记技术

服务名称 ：SILAC 细胞培养条件下稳定同位素标记技术

提供商 ：北京蛋白质组研究中心

（Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture，SILAC），这种方法首先是由2002年丹麦Mann实验室的Ong等对AACT技术作了进一步改进而获得的，他们首次应用于定量蛋白质组研究，为全面、系统地定性和定量分析复杂哺乳动物细胞蛋白质组提供了有效的方案。





SILAC的基本原理是分别用天然同位素(轻型)或稳定同位素(重型)标记的必需氨基酸取代细胞培养基中相应氨基酸，细胞经5-6个倍增周期后，稳定同位素标记的氨基酸完全掺入到细胞新合成的蛋白质中替代了原有氨基酸。不同标记细胞的裂解蛋白按细胞数或蛋白量等比例混合，经分离、纯化后进行质谱鉴定。
研究人员通过在细胞培养时加入稳定的同位素标记的氨基酸，用这种方法进行双重的蛋白质序列分析，从而可以跟踪蛋白质的转归或者对不同培养条件下蛋白质的表达情况进行比较。