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文献和实验
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库存 :59
英文名 :柱式真菌 RNAout
CAS号 :详见说明书
保质期 :详见说明书
供应商 :上海邦景
保存条件 :低温冷藏
规格 :50 次
点击了解更多RNA纯化产品:柱式真菌 RNAout50 次规格详细介绍:
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是柱式真菌 RNAout50 次规格的相关产品:
dNTP 溶液 ,10mM0.5mL 古细菌种属鉴定 PCR Mix 1100 次
dNTP 溶液 ,10mM5mL 古细菌 + 真细菌种属鉴定 PCR Mix 3100 次
dNTP 溶液,2.5mM0.5mL 宫颈采样拭子 B 50 支
dNTP 溶液,2.5mM5mL 宫颈采样拭子 A 50 支
dNTP 溶液,100mM 0.5mL 革氏阳性细菌质粒 DNAout50 次
柱式毛发 DNAout50 次 一站式 Blue Native PAGE 电泳套装30 次
痰液 DNAout50 次 一管式植物 DNAout500 次
痰液采集器1个 一管式植物 DNAout50 次
柱式骨骼 DNAout50 次 一管式双链 cDNA 合成试剂盒10 次
柱式拭子 DNAout50 次 一管式拭子 DNAout20 次
一步式广谱 DNAout10mL 土壤 RNAout50 次
微量核酸提取试剂盒50 次 土壤 DNAout30 次
微量核酸提取试剂盒200 次 土壤 DNAout100 次
液体 DNAout50 次 土霉素盐酸盐溶液 ,100mg/mL10mL
液相内毒素清除剂100 次 通用型全基因组扩增试剂盒30 次
Stuart运送培养基管 英文名称; Stuart Transport Medium 规格; 20支/包
Cary-Blair氏运送培养基管 英文名称; Cary-Blair Transport Medium 规格; 20支/包
MEM维持液 英文名称; MEM maintenance of fluid 规格; 36支/盒
无菌生理盐水管(内附采样棉签) 英文名称; 规格; 10ml*20支/包
Hanks氏病毒保存液(pH7.4-7.6) 英文名称; 规格; 3ml*36支/盒
无菌采样袋(12cm*18cm)(带压条) Aseptic Sampling Bag 100个/包
无菌水样采集袋(含0.4mg硫代硫酸钠) Water Aseptic Sampling Bag 100个/箱
Cary-Blair运送培养基管(液体)含拭子 10ml×20支
无菌取样袋(带铁丝)(30cm*18cm) 50个/包*4
厌氧培养产品系列
柱式真菌 RNAout50 次规格琼脂培养基F(紫红胆盐葡萄糖琼脂) 用于肠道菌计数和肠杆菌科鉴别用途:用于肠道菌计数和肠杆菌科鉴别。用法Suspend 51.5g/liter, heat to boiling with frequent stirring until completely dissolved.称取本品 51.5g,加热溶解于 1000ml 纯化水中,煮沸不要超过 2 分钟,冷至 50℃左右时倾入无菌平皿。无需高压灭菌。
肠道菌富集肉汤培养基(USP) 用于肠杆菌科细菌的选择性增菌培养用途:用于肠杆菌科细菌的选择性增菌培养。用法Suspend 45.0g/liter,distribute 90mlportions to test tubes. Heat at 100℃for 30min and cool immediately.Do not heat in an autoclave.称取本品 45.0g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶每瓶 90ml, 100℃水浴加热 30 分钟 , 迅速在流动的冷水中冷却,无需高压灭菌。
革兰氏阴性菌增菌液 用于革兰氏阴性细菌增菌培养用途:用于革兰氏阴性细菌增菌培养。用法称取本品 34g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,21℃高压灭菌 15 分钟,备用。
大肠杆菌噬菌体MS2液体培养基 用于大肠杆菌噬菌体MS2培养用途:用于大肠杆菌噬菌体MS2培养。用法称取本品 24.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15分钟,备用
操作步骤:
1. 柱式真菌 RNAout50 次规格匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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