产品详情
文献和实验
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英文名 ：Hygromycin B
保质期 ：1年
供应商 ：复百澳
保存条件 ：4°C
规格 ：1ml
Hygromycin B产品使用说明书
1、产品信息：
产品名称：Hygromycin B（潮霉素B）
货 号：
存储浓度：
产品规格：
化学式：C20H37N3O13
分子量：527.52
外观（性状）：澄清或轻微浑浊黄色溶液
2、运输和储存条件
本产品在低温下快递寄送。收到后请于4℃保存，有效期1年。
3、作用机制：
Hygromycin B是由吸水链霉素（Streptomyces hygroscopicus）代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白质合成，进而杀死原核（如细菌）、真核（如酵母菌，真菌）和高等哺乳动物真核细胞。目前常用于筛选和维持培养含潮霉素抗性基因的原核或真核细胞。
常用于筛选和维持培养含潮霉素抗性基因Hph+（潮霉素 B磷酸转移酶）的原核细胞或真核细胞；
由于作用模式的差异，Hygromycin B常与G418 ，Zeocin和Blasticidin S联合使用，筛选稳定转染两个不同载体的细胞株。
4、使用方法：
1、本品是无菌的Hygromycin B溶液，可直接用培养基稀释使用，或先用溶剂水或PBS溶液稀释到低浓度备用。
2、常用浓度：Hygromycin B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型、培养基、生长条件和细胞代谢率而变化，对于大多数哺乳动物细胞，推荐使用浓度为200-500ug/mL，最佳浓度需要通过建立杀灭曲线（kill curve）来确定。
3、杀灭曲线确定最佳杀死浓度：
更多技术资料您可关注复百澳生物微信公众号，或访问复百澳生物官网：http://www.fubio.cn/获取。
1、产品信息：
产品名称：Hygromycin B（潮霉素B）
货 号：
存储浓度：
产品规格：
化学式：C20H37N3O13
分子量：527.52
外观（性状）：澄清或轻微浑浊黄色溶液
2、运输和储存条件
本产品在低温下快递寄送。收到后请于4℃保存，有效期1年。
3、作用机制：
Hygromycin B是由吸水链霉素（Streptomyces hygroscopicus）代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白质合成，进而杀死原核（如细菌）、真核（如酵母菌，真菌）和高等哺乳动物真核细胞。目前常用于筛选和维持培养含潮霉素抗性基因的原核或真核细胞。
常用于筛选和维持培养含潮霉素抗性基因Hph+（潮霉素 B磷酸转移酶）的原核细胞或真核细胞；
由于作用模式的差异，Hygromycin B常与G418 ，Zeocin和Blasticidin S联合使用，筛选稳定转染两个不同载体的细胞株。
4、使用方法：
1、本品是无菌的Hygromycin B溶液，可直接用培养基稀释使用，或先用溶剂水或PBS溶液稀释到低浓度备用。
2、常用浓度：Hygromycin B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型、培养基、生长条件和细胞代谢率而变化，对于大多数哺乳动物细胞，推荐使用浓度为200-500ug/mL，最佳浓度需要通过建立杀灭曲线（kill curve）来确定。
3、杀灭曲线确定最佳杀死浓度：
- 第一天：将未转染的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃细胞孵育过夜；
- 第二天：根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度（至少选择5个浓度），每孔加入含不同浓度Hygromycin B的新鲜培养基；接下来3-4天更换新的含药物培养基；
- 按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数，来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。一般选择在7-10天内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
- 对感染或转染有Hygromycin B药物耐受的细胞，更换为含相应浓度的Hygromycin B的培养基，继续培养；
- 每隔3-4天换液，更新含有Hygromycin B药物的筛选培养基；
- 维持培养7-10天，筛选出能够表达潮霉素B抗性表型的活细胞；更换为常规培养基。
- 本品为有毒化合物，避免与皮肤和眼睛接触，请小心操作；
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
更多技术资料您可关注复百澳生物微信公众号，或访问复百澳生物官网：http://www.fubio.cn/获取。
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