产品详情
文献和实验
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库存 :320
英文名 :Native PAGE Gel 4-15%, 15 wells
保质期 :18个月
供应商 :北京百奥莱博科技有限公司
保存条件 :4℃
规格 :10块
特别提示:包括非变性蛋白电泳预制胶(4-15%,15孔)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:非变性蛋白电泳预制胶(4-15%,15孔)
英文名称:Native PAGE Gel 4-15%, 15 wells
产品货号:QN2766
产品规格:10块
本预制胶是我公司开发的高性能低成本Native PAGE预制凝胶。预制胶将凝胶事先配制好,使用者拿来即可上样进行电泳,减去了用户自配凝胶的麻烦,节约了大量的时间。本预制胶默认送Running buffer,预制胶一定要用我们赠送的running buffer作为电泳缓冲液,其他的缓冲液不匹配。
产品特点:
·特制凝胶和缓冲液配方,分辨率高,条带清晰,电泳效果极佳。
·保存期长,4℃储存达到18个月胶夹打开极为轻松,无需起撬工具。
·兼容目前市场各种电泳槽,如BIORAD,六一,天能和君意东方等。
·可用于SDS非变性电泳。
·10%,12%,15%及4-15%梯度等多种不同浓度供选择,1.5mm胶厚度。
·电泳时间短,在150V电压下,电泳40-50分钟即可完成。
·出售时免费附送足量的电泳缓冲液。
·玻璃电泳板蛋白吸附率低,电泳效果更好。
产品参数:
胶板尺寸:9.8×8.4×0.41cm
凝胶尺寸:8.1×7.4×0.15cm
浓度:4~15%
分离范围:200Da~10KDa
孔数:15wells
上样量:60μl
应用:Western blot
保存:4℃,有效期18个月
除了非变性蛋白电泳预制胶(4-15%,15孔),,我公司还供应以下相关产品:
名称:卵白蛋白标准品(2mg/mL)
货号:BTN90610
规格:1mL
本产品是浓度为2mg/mL的卵白蛋白,用做蛋白测定的标准品。
储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。
名称:一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装
货号:BTN80810
规格:30次
SDS-聚丙*酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是目前电泳法变性分离蛋白质的主要方法,但是单独配制各种溶液十分繁琐,为此我们公司开发了本产品。
产品特点:
1.一站式,即开即用,用户不需单独准备各种成分,十分方便。
2.安全,将实验人员接触粉末状丙*酰胺的可能降到zuì低。
3.灵活,分开提供的丙*酰胺和甲叉双丙*酰胺便于配制各种比例和浓度的SDS-PAGE,满足分离各种大小不同的蛋白质的要求。
4.使用改良的浓缩胶缓冲液,由于其含有染料,制备的浓缩胶呈蓝色,便于上样时识别加样孔。
5.电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
产品组成:
成分 | 规格 |
丙*酰胺干粉 | 60g |
甲叉双丙*酰胺干粉 | 3g |
分离胶缓冲液,4× | 200ml |
浓缩胶缓冲液,4×(含染料) | 100ml |
TEMED | 1.5ml |
过*酸铵(干粉) | 1g |
SDS-PAGE上样液,5× | 1套(1mL) |
SDS-PAGE电泳液,1×(干粉) | 1套(20L) |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,但TEMED和5×SDS-PAGE上样液需低温运输,分别在4℃和-20℃有效期一年。
自备试剂:去离子水。
使用方法:
1.第一次使用本产品时需先配制30%丙*酰胺溶液:在本产品提供的装有60克丙*酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水,充分摇晃直到溶解即得200mL 30%丙*酰胺溶液(用手大约摇10-20分钟)。
2.第一次使用本产品时还需配制30%丙*酰胺-甲叉双丙*酰胺(19:1)溶液(30% AB溶液,下同): 不同实验需要加入不同比例的甲叉双丙*酰胺。对SDS-PAGE电泳,丙*酰胺与甲叉双丙*酰胺比例一般在19:1左右,因为此时PAGE胶的孔径zuì小,分辨率zuì高。制备方法是将3g甲叉双丙*酰胺干粉加入到200mL上步配好的30%丙*酰胺溶液中(注意:甲叉双丙*酰胺干粉有神经毒性,避免吸入粉末)。配好的30%AB溶液zuì好4℃避光保存并在1月内用完。
3.根据平板的面积和胶的厚度估计需要配制的浓缩胶和分离胶的体积。并根据要分离的蛋白质的大小确定选择浓缩胶和分离胶的浓度,参考下表:
蛋白质大小范围(kD) | zuì佳浓缩胶浓度 | zuì佳分离胶浓度 |
15-45 | 4% | 15% |
15-60 | 4% | 12.5% |
18-75 | 4% | 10% |
30-120 | 4% | 7.5% |
60-200 | 不需要 | 5% |
注:如果上样体积少于10μL,可以不需要浓缩胶。
4.配制10%的APS(过*酸铵):称0.1克过APS干粉到1mL去离子水中,摇晃溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
5.配制分离胶:在一个25mL的三角瓶中,先按下表的用量加入水、30%AB溶液和4×分离胶缓冲液。以下是配制10mL胶的用量,更大体积则各成分用量需按比例增加。丙*酰胺溶液有神经毒性,一定要戴手套操作。
胶浓度 | 用量(单位:mL) | ||
水 | 30%AB溶液 | 4×分离胶配胶液 | |
5% | 5.83 | 1.67 | 2.50 |
6% | 5.50 | 2.00 | 2.50 |
7% | 5.17 | 2.33 | 2.50 |
7.5% | 5.00 | 2.50 | 2.50 |
8% | 4.83 | 2.67 | 2.50 |
9% | 4.50 | 3.00 | 2.50 |
10% | 4.17 | 3.33 | 2.50 |
11% | 3.83 | 3.67 | 2.50 |
12% | 3.50 | 4.00 | 2.50 |
13% | 3.17 | 4.33 | 2.50 |
14% | 2.83 | 4.67 | 2.50 |
15% | 2.50 | 5.00 | 2.50 |
16% | 2.17 | 5.33 | 2.50 |
6.配制浓缩胶(一般使用4%的浓度):在一个25mL的三角瓶中,先按下表的用量加入水、30%A B溶液和4×浓缩胶缓冲液。以下是配制10mL 4%浓缩胶的用量,丙*酰胺溶液具有神经毒性,一定要戴手套操作。
胶浓度 | 用量(mL) | ||
水 | 30%AB溶液 | 4×浓缩胶缓冲液(含蓝色染料) | |
4% | 6.17 | 1.33 | 2.50 |
7.将分离胶和浓缩胶溶液摇晃混匀,抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*酰胺聚合反应,不去除将影响丙*酰胺聚合反应)。
8.分别加入50μL 10%APS和30-50μL TEMED(这是配制10mL分离胶和浓缩胶的用量,更大体积的胶则用量需按比例增加),迅速摇匀。
9.先灌分离胶,在胶的液面距离顶部1.5 cm的时候,停止灌胶。
10.由于分离胶比重较大,可以立即在上面灌浓缩胶,但灌注时必须小心,不要破坏分离胶和浓缩胶的液面,在浓缩胶液面达到顶部时停止灌胶,插入梳子,室温聚合30-60分钟。如果不能做到小心灌浓缩胶,则必须待分离胶室温聚合30-60分钟后再灌制。
11.拔出梳子,用1×SDS-PAGE电泳液冲洗加样孔。
12.将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽加入足够的1×SDS-PAGE电泳液。本产品提供20升的SDS-PAGE电泳液干粉,将所有干粉溶解在2 L水中即得10×SDS-PAGE电泳液,用时再稀释成1×工作液。
13.在蛋白质样品中加入5×SDS-PAGE上样液(4μL样品中加1μL上样液),100℃煮沸3~5分钟。短暂离心,取上清上样。
14.先用10 mA的电流电泳(对0.75mm厚×14cm×14cm的胶)直到染料进入从浓缩胶进入分离胶。
15.将电流增加到15 mA,直到染料进入分离胶底部时终止电泳,取出凝胶进行后续的实验处理。
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